2020-03-15 09:57:06, Qing Tian Zhu Cytiva(思拓凡)
随着层析技术的不断发展,除了常见的4大层析技术(分子筛、亲和、离子、疏水)外,多模式填料逐步走入我们的视线,那让我们一起来了解一下最新的三种多模式填料吧:
Capto MMC & Capto MMC ImpRes,
弱阳离子复合模式填料
从图中我们可以看到,MMC的配基包含除了常规的弱阳离子的功能基团外,还有苯环的疏水基团以及氢键、嗜硫键的存在。因此,它有着其它离子交换所无法企及的特点——耐受高盐上样:
耐受高盐上样的好处在于,当样品处于较高盐离子浓度的时候,我们无需经过脱盐的处理即可直接上样,减少了实验步骤,却仍能获得很好的载量。除此之外,因为其包含了多种不同的作用力,有着比一般的弱阳离子更好的选择性,在单抗及一些抗体片段的精细纯化步骤中,Capto MMC ImpRes也有非常不错的效果。
Capto adhere & Capto adhere ImpRes,
强阴离子复合模式填料
同样,adhere的配基除了具有强阴离子交换位点外,还带有一个苯环的疏水作用力以及氢键的相互作用力。adhere 本身也是一个复合名词,源自于它能够去除的多种杂质的首字母的整合:
可见,adhere有着非常强大的功能。它可应用于抗体工艺中的精细纯化,并且在一些特定抗体的纯化工艺中,adhere的两步法可以很好地替代原有的三步层析而获得足够质量标准的产品。除此之外,在多糖疫苗的纯化中,它也有不错的效果。
总结一下这两款离子加疏水的复合模式填料,我们可以看到,它们都在各自领域拥有不错的应用,也拓宽了常规单一离子模式的操作空间,实现跨越等电点的结合区间,同时也拥有更多的选择性。
Capto Core 700
Capto Core 700,与前两种相比,它是分子筛与阴离子交换以及疏水相结合的多模式填料。
它有着一个惰性的壳,而这个壳的平均截留分子量为700kDa,内里是带辛胺基团的复合配基,能够和多种杂质有非常强的结合。因此它非常适合用于病毒、疫苗这类大分子的分离纯化。大颗粒的目标分子因为其700kDa的拦截而直接从外水出来,小分子的杂质,如宿主蛋白、DNA片段,内毒素、去污剂等则会进入到内水,也就是凝胶的内侧,与配基发生相互作用而被吸附。因此,与传统的单一分子筛模式的病毒纯化相比,它有着更高的上样量、更高的效率与回收率的优势。结合上游工艺的优化,能够一步获得很好的纯度。
目前Capto Core 700 已在多种病毒、疫苗的纯化领域获得很好的应用:
三种不同的多模式填料在各自领域都有着非常出色的表现,更多不同的应用期待着与大家一起来发现。
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