「哥」家的层析填料，你选对了吗？

2020-03-14 19:39:24, Jiang Mingzhe Cytiva（思拓凡)

前言

填料的选择，对于初次踏入纯化领域的人来讲无疑是让人抓狂的！不同的层析类型，不同的填料粒径，不同的配基基团，不同的层析柱规格，不同的纯化方案……不用迷茫，小编今天带您一起踏上「哥」家层析填料探索之旅！

undefined

了解目标纯化分子的性质

差异是分离目标分子与杂质分子的基础。在设计纯化方案之前，我们需要通过资料查询、稳定性实验等方式获得目标蛋白的基本性质。然后根据样品的基本性质确定合理可行的纯化路线。一般而言，纯化按照 CIPP 纯化三部曲进行，即：捕获（capture）→中度纯化（intermediate purification）→精细纯化（polish）。

常见的工艺路线如下表所示：

查找《凝胶选择指南》

所谓手册在手，填料我有！《凝胶选择指南》是一本汇总了「哥」家大部分层析填料产品的工具手册，内容丰富完整。

主要内容包括：手动纯化产品、凝胶过滤填料、离子交换填料、亲和层析填料、疏水填料和反相填料几大类填料产品的关键信息，其中对明星产品（比如 Mabselect PrismA，capto S ImpAct，capto Core 700 等）做了详细介绍；除此之外，手册中还汇总了实验室和工业级别常用的层析柱和配件，以及比较成熟的工艺平台方案（如抗体平台，重组标签蛋白平台，多糖平台等等）。

要想熟练使用《凝胶选择指南》，我们需要了解清楚手册中每个关键参数的含义；除此之外，每种类型的层析填料也有一些考虑事项。接下来，听小编为您仔细道来！

① 产品关键参数的含义（以凝胶过滤预装柱为例）

★ 凝胶过滤预装柱

② 不同层析原理填料产品的选择考虑要点

★ 凝胶过滤析填料

★ 亲和层析填料

亲和层析四大主要应用分别为：抗体纯化、标签蛋白纯化、族特异性亲和层析和使用预活化填料自行制作的亲和层析纯化。其中经典应用当属抗体纯化和标签蛋白纯化。

抗体纯化亲和填料选择的考虑要点：

标签蛋白纯化亲和层析填料的选择思路：

★ 离子交换层析填料

★ 疏水层析填料

由于蛋白表面的疏水强度大小不易预测，所以小编建议您首选「哥」家的疏水填料筛选试剂盒，产品信息如下：

HiTrap Capto HIC Selection Kit 5*1 mL：货号：29321087，内含 capto phenyl HS，capto phenyl ImpRes，capto Butyl，capto Butyl ImpRes，capto Octyl 各一根。

HiTrap HIC Selection Kit 7*1 mL：货号：28411007，内含 Phenyl Sepharose HP，Phenyl Sepharose FF（LS），Phenyl Sepharose FF（HS），Butyl Sepharose FF，Octyl Sepharose FF，Butyl Sepharose HP 及 Butyl-S Sepharose FF 各一根。

官网查询

通过《凝胶选择指南》确定下要使用的具体填料之后，您可以登录 GE life science 官网 [https://www.gelifesciences.com/en/us (小建议：进入官网后区域选择 United States）]。按照如下流程下载填料相关文档，比如：说明书、datafile、应用文章等。