色谱柱的使用（六）论色谱柱与仪器的匹配性

提到速度与通量，越来越多的分析人员追求更高的效率，也越来越青睐短小高效的色谱柱。可是，实验室摆满了不同规格大大小小的色谱柱，也挤满了不同品牌、不同时期的仪器系统，从HPLC、到UHPLC、甚至UPLC，都无所不包。

很多分析人员，只知道色谱柱的耐压能力要与系统的日常运行压力相匹配，却不知道系统还会影响柱效和分离度。这导致大家在日常使用中，常常发生因为色谱柱与仪器的匹配不佳而使得分析结果不理想、项目速度受到影响的情况，如下图：相同色谱柱相同色谱条件在不同仪器上测试结果差异明显。

今天，我们针对这个典型问题，好好解说解说。

系统死体积测试方法

谱带展宽测定应当在配有检测器的液相色谱系统上进行。

1）断开色谱柱与系统的连接并替换为零死体积二通。

2）将泵系统的流速设置为1 mL/min。

3）使用的测试混合物(在流动相条件下溶解)其最大峰高响应值应低于0.5 AU。

4）进样此溶液2-5 μL。

5）采用5-Sigma法测量4.4%峰高处的峰宽(分钟)。

谱带展宽(μL)=峰宽(min)×流速(μL/min)

(例如，如果峰宽=0.1 min，流速=1000 μL/min。那么谱带展宽=100 μL）