Maurice+Wes: 疫苗载体蛋白定量检测

多糖蛋白为胸腺非依赖抗原，在成人效果好，但是对于年龄小于2岁儿童效果差。因而多糖结合疫苗设计时，会将多糖抗原和载体蛋白共价结合，成为胸腺依赖性抗原，在儿童中获取好的免疫效果。

国外已批准上市的结合疫苗载体蛋白供5种：破伤风类毒素（TT），白喉类毒素（DT），白喉毒素无毒突变体（CRM197），B群脑膜炎球菌外膜蛋白（OPM）和不可分型流感嗜血杆菌蛋白D（HiPD）。

在细胞裂解液和纯化样本中检测载体蛋白检测载体蛋白等电点等，对于质量控制非常重要，在国家药典等权威文件中都有收录。

全球著名疫苗生产厂家Merck发表文章，评价Maurice和Wes组合使用，定量检测疫苗中载体蛋白的等电点等。

Quantitation of CRM197 using imaged capillary isoelectric focusing with fluorescence detection and capillary Western. John W. Loughney, Sha Ha, Richard R. Rustandi，Analytical Biochemistry，(2017), doi: 10.1016/j.ab.2017.06.013.

在Maurice产品上市之前，Merck使用iCE280和iCE3进行载体蛋白等电点检测检测，参考文章：Use of imaged capillary isoelectric focusing technique in development of diphtheria toxin mutant CRM197，Electrophoresis 2014, 00, 1–7。

基于UV 280的方法，对于纯化样品效果好，但是对于细胞裂解液检测效果不好，主要因为裂解液中干扰蛋白较多。

上图：iCE3纯化样本检测

上图：Maurice UV280检测细胞裂解液样品

Maurice 自发荧光检测模式可以很好解决这个问题。

Maurice 自发荧光模式检测细胞裂解液样本。可以排除干扰。

在比较粗杂的细胞裂解液中，Merck的科学家使用CE-based Western blot，Wes进行CRM197检测，并进行定量。

Wes和Maurice在欧美已经被众多疫苗大厂用于研发和质量控制：疫苗抗原表达，克隆筛选，抗体结合实验，免疫学鉴定，等电点检测等。

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