成像大赛作品秀 | 斑马鱼血液流动之荧光与明场DIC同步高速成像

作者：薛志文

所用相机：Flash 4.0 LT(C11440-42U) & W-View GEMINI双色分光器

成像方法：荧光&明场高速同步成像

显微镜物镜：UPlanFL N 20x NA 0.50

拍摄条件：荧光曝光时间2.5 ms；明场曝光时间2.5 ms

本作品拍摄的是斑马鱼尾部血管中血细胞的高速流动情况，部分细胞被标记了绿色的荧光。为了区分清楚同时处于高速运动状态的被标记细胞和普通细胞，以及看清楚其具体的行为，我们不仅需要高速采像，而且需要完全同步地拍摄到样品荧光和明场的图像；否则对于这样高速运动的样品，先拍一张明场再拍一张荧光就很难做到细胞的一一对应。

而为了达到这些要求，我们采用红光进行明场的拍摄，这样W-View GEMINI双色分光器就可以将红色的明场信号及绿色的荧光信号分光并成像到相机芯片的两边，实现完全同步地荧光和明场成像。而滨松的Flash 4.0 LT sCMOS相机不仅能够实现400帧/秒的高速拍摄，而且其高灵敏度保证了对应的2.5ms曝光时间下荧光图片的清晰。

实验系统