核酸药物研发：SCIEX Triple Quad™质谱系统高灵敏度寡核苷酸定量方案

2026-07-14 11:57:40, SCIEX SCIEX

背景

随着生物医药领域的快速发展，寡核苷酸类药物正成为基因治疗的重要方向。其中在ASO、siRNA等寡核苷酸药物的研发中，尤其是PK/PD研究，如何快速完成复杂生物基质中，高灵敏、高特异的定量分析至关重要；利用SCIEX Triple Quad™质谱系统，结合高效固相萃取前处理方法，快速建立血浆中寡核苷酸高灵敏定量方法，为寡核苷酸药物的生物分析提供了全新快速的高灵敏解决方案。

方案核心

1. 高灵敏度三重四极杆平台：

SCIEX Triple Quad™系统具有优异的灵敏度和稳定性，为寡核苷酸药物定量提供方法支撑。

2. 高效的样品制备：

采用96孔板格式的固相萃取（Phenomenex，Clarity OTX）进行血浆样本前处理，在有效净化的同时，大幅提升了样本处理通量和效率。

3. 一体化软件平台：

SCIEX OS软件为方法开发、数据采集和处理提供了统一、合规且便捷的操作环境。

方案结果

高灵敏度

pg级定量下限：对血浆中的寡核苷酸（P-Thio）可实现定量下限（LOQ）低至20 pg/mL，且空白血浆无干扰峰（如图1所示），完全适配极低浓度生物样本的检测需求；此外，定量分析血浆中的ASO药物Inotersen，其LLOQ可达200 pg/mL（如图2所示），同样展现了优异的方法选择性和灵敏度，轻松满足寡核苷酸药物研发的高灵敏度需求。

图1. P-Thio寡核苷酸在空白血浆、

20pg/mL、50pg/mL、200pg/mL浓度下色谱图

图2.Inotersen在空白血浆、200pg/mL、500pg/mL浓度下色谱图

宽线性范围

SCIEX Triple Quad™系统凭借稳定离子源与精准定量能力，实现宽线性覆盖。血浆中的寡核苷酸（P-Thio），在20 pg/mL 至 20,000 pg/mL的浓度范围内线性关系良好（r² > 0.997）。对于Inotersen，其在血浆中的线性范围覆盖0.2 ng/mL至500 ng/mL，相关系数r²大于0.996。高低浓度样品均可准确定量，数据精准无偏差。

图3. P-Thio寡核苷酸20~20000 pg/mL浓度范围标准曲线

图4. Inotersen寡核苷酸0.2~500 pg/mL浓度范围标准曲线

优异重现性

方法的精密度与准确度是数据可靠性的关键。针对低浓度点进行重复性验证，寡核苷酸（P-Thio）在LOQ浓度（20 pg/mL）及附近浓度（50 pg/mL）进行验证，精密度（RSD）分别仅为6.67% 和 2.87%；对于Inotersen，在LOQ（0.2 ng/mL）浓度下连续进样6针的RSD%小于3.5%，全程信号稳定无漂移，确保实验数据可靠、准确。

处理方法简单，回收率高

采用飞诺美Clarity OTX™萃取试剂盒对血浆样品进行前处理，处理方法简单，能够有效的实现对样品的净化，提取回收率高。

总结

从pg/mL级别的高灵敏度检测、超宽的线性范围，到优异的重现性与强大的抗基质干扰能力，SCIEX Triple Quad™系统结合高效样品前处理的解决方案，有效完成血浆等复杂基质中寡核苷酸定量分析工作。该方案不仅为Inotersen等寡核苷酸药物的生物分析提供了可靠方法，其通用流程也为其他ASO、siRNA等寡核苷酸药物的研发、药代动力学研究与质量控制提供了有力的技术支撑与保障。