肌苷的分析 参考《中国药典》（2025年版）二部

肌苷是由次黄嘌呤与核糖结合而成的核苷类化合物，临床应用广泛，可适用于各种原因引起的白细胞减少症、急性及慢性肝炎或肝硬化、各种心脏疾患等。

按照《中国药典》（2025年版）二部肌苷项目中有关物质和含量测定项下方法，筛选色谱柱进行测试。

考虑到该方法流动相条件为5%甲醇，因此选用耐100%水相的CAPCELL PAK C18 AQ和DAISOPAK SP-ODS-BP色谱柱进行分析。

在药典条件下，2支色谱柱均能满足药典要求，肌苷峰与鸟苷峰分离度均在3以上，且理论塔板数均在10,000以上。

有关物质

按照有关物质项下分析条件，使用CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色谱柱分析结果如图1、图2所示。

系统适用性溶液中，肌苷保留时间为14.08 min，与鸟苷峰分离度4.02，能够满足药典不低于3.0要求，理论塔板数11,040，满足药典不低于3,000要求，不对称因子1.10，峰型良好。

图1  系统适用性溶液分析谱图

图上所示数字为分离度、理论塔板数

表1  各峰积分结果表

图2  供试品分析结果

【色谱条件】

色谱柱：CP C18 AQ S5; 4.6×250 mm

流动相：甲醇 / 水 = 5 / 95

流速：1.0 mL/min

柱温：25 ℃

检测：UV 248 nm

进样量：10 μL

系统适用性溶液：按照药典方法配置，次黄嘌呤0.5 µg/mL、鸟苷1.5 µg/mL、肌苷0.5 mg/mL （水溶）

供试品：0.5 mg/mL （水溶）

含量测定

按照含量测定项下方法，同样能够获得良好分析结果，结果如图3所示，肌苷峰形良好，不对称因子为1.02。

图3  含量测定分析结果

【色谱条件】

色谱柱：CP C18 AQ S5; 4.6×250 mm

流动相：甲醇 / 水 = 5 / 95

流速：1.0 mL/min

柱温：25 ℃

检测：UV 248 nm

进样量：10 μL

供试品：20 μg/mL （水溶）

有关物质

按照有关物质项下分析条件，使用DAISOPAK SP-120-5-ODS-BP S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色谱柱分析结果如图4、图5所示。

系统适用性溶液中，肌苷保留时间为15.78 min，与鸟苷峰分离度3.98，能够满足药典不低于3.0要求，理论塔板数13,328，满足药典不低于3000要求，不对称因子1.11，峰型良好。

图4  系统适用性溶液分析结果

图上所示数字为分离度、理论塔板数

表2 积分表

图5  供试品分析结果

【色谱条件】

色谱柱：DP SP-ODS-BP S5; 4.6×250 mm

流动相：甲醇 / 水 = 5 / 95

流速：1.0 mL/min

柱温：25 ℃

检测：UV 248 nm

进样量：10 μL

系统适用性溶液：按照药典方法配置，次黄嘌呤0.5 µg/mL、鸟苷1.5 µg/mL、肌苷0.5 mg/mL （水溶）

供试品：0.5 mg/mL （水溶）

含量测定

按照含量测定项下方法，同样能够获得良好分析结果，结果如图6所示，肌苷峰形良好，不对称因子为1.10。

图6  含量测定分析结果

【色谱条件】

色谱柱：DP SP-ODS-BP S5; 4.6×250 mm

流动相：甲醇 / 水 = 5 / 95

流速：1.0 mL/min

柱温：25 ℃

检测：UV 248 nm

进样量：10 μL

供试品：20 μg/mL （水溶）

综上所述，按照《中国药典》（2025年版）二部肌苷项目中有关物质和含量测定项下方法，使用耐100%水相的CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6 mm i.d.×250 mm和DAISOPAK SP-120-5-ODS-BP S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色谱柱，能够获得良好检测结果。