【应用分享】乳粉中丙烯酰胺的提取与检测

咖啡、茶叶、食糖、婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品

准确称取试样0.5 g~1 g (精确到0.001 g) ，加入10 mg/L丙烯酰胺内标工作溶液10 μL (层析柱法) 或20 μL (基质分散固相萃取法和固相萃取法) ，再加入水10 mL，振摇30 min后，以4000 r/min离心10 min，取上清液待净化。如无法通过离心获得上清液，如速溶咖啡、婴幼儿乳粉等基质样品，则取悬浊液待净化。

基质分散固相萃取法 (适用于所有食品) ：SelectCore QuEChERS净化管 15mL (P/N: Q-15PCS01)

在试样提取的上清液中，加入5 mL正己烷，振荡萃取5 min，于10000 r/min离心5 min，除去有机相，再用5 mL正己烷重复萃取一次，在提取液加入10 mL乙腈，振荡提取10 min，加入0.5 g氯化钠和4 g无水硫酸钠作为盐析剂，振荡5 min。以10000 r/min离心5 min，取2.50 mL上清液于Q-15PCS01净化管中，涡旋5 min，以10000 r/min离心5 min，取1 mL上清液于氮气浓缩器中吹干，用0.20 mL水复溶，经0.22 μm水系滤膜过滤，待测定。

注：上机测试样液中有机相比例越高，出峰时间前移，峰形变差；氮吹近干不易控制，需要氮吹干，再用水复溶。

图2、乳粉样品及不同加标量多反应监测 (MRM) 质量色谱图

由以上实验谱图及加标回收率数据可知：纳谱分析的Q-15PCS01净化管净化后的溶液澄清透明，并且有效去除样品中干扰成分，再搭配ChromCore C18-Acrylamide丙烯酰胺专用柱进行分析测定，丙烯酰胺回收率符合检测要求。

实验注意事项

1、正己烷萃取离心后，会出现较多乳化层，去除正己烷时应该避免去除这部分，正己烷可以不完全去除；

2、加入盐析剂振荡离心后会出白色物质造成干扰，导致中间层乙腈和上层正己烷分界线不明显，所以在取中间乙腈层时，移液枪枪头尽可能靠近下层水相和中间层乙腈分界线，取2.5 mL乙腈至净化管中，涡旋离心即可；

3、氮吹需要吹干，有机相残留量会影响目标峰保留时间以及峰型。