in vivo CAR-T递送载体的前沿策略与精准分析线下沙龙圆满落幕

会议伊始，ATLATL飞镖创新中心首席执行官/创始人朱鹏程以“生命科学工程化让创新井喷”为题发表开场演讲。他指出，现代生命科学的突破越来越依赖工程化平台的支持，ATLATL致力于为早期创新项目提供高能级的共享研发基础设施，助力in vivo CAR-T等前沿技术加速从概念走向临床。

君健生物首席科学官王友如老师系统梳理了in vivo CAR-T的构建逻辑，对比了两大平台——整合型病毒载体（如慢病毒）适合肿瘤长期治疗，而瞬时表达的LNP平台因安全性更优，被视为自身免疫病等领域的理想选择。对于非临床评价基于“风险导向”与“个案处理”原则，研究需重点验证药效（体内生成效率）、药代（组织分布与脱靶风险）及安全性（CRS、遗传毒性、生殖毒性）。

SCIEX中国应用支持工程师张晓霞老师展示了SCIEX在病毒载体与mRNA-LNP表征中的完整解决方案。她重点介绍了：在质粒分析方面，CGE-LIF方法已被2025版《中国药典》通则3431收录，可用于质粒DNA超螺旋、线性、开环三种构象的含量测定；在AAV衣壳蛋白表征中，高分辨质谱可精确区分不同血清型及不同生产细胞系（如SF9与HEK293）导致的蛋白修饰差异；在mRNA质量分析中，CE技术可实现mRNA完整性、加帽效率及Poly A尾巴分布的精准测定。她强调，精准表征是保障in vivo CAR-T递送系统安全性与批次一致性的基础。

来自上药集团生物治疗质量与注册总监张长风博士从中美监管视角出发，对比了中美对体内CART产品的关注要点，并分析了行业近况。近年来，基于LNP和慢病毒的体内CART技术迅速升温，在非临床研究中，监管机构高度关注基因毒性（如整合致癌风险）、脱靶转导、生殖毒性等问题，要求提供载体分布、整合位点分析等数据。临床设计上，体内CART可沿用自体CART框架，但无需化疗预处理，PK监测需同时关注前药（载体）和活性产物（体内生成的CART细胞）。总体而言，体内CART因结合了传统药品逻辑与细胞治疗优势，更易被药企理解和接受，成为CGT领域的新热点。

贝克曼库尔特生命科学流式高级技术专家施敏详细介绍了流式细胞术在药物研发临床前实验中的多元应用。他指出，流式技术可贯穿药物发现全流程：从单克隆细胞株筛选、抗肿瘤药物筛选，到免疫分型、细胞功能分析（如细胞因子检测、磷酸化检测、细胞活力、凋亡、增殖、微核检测、活性氧检测、吞噬功能等），再到受体占用分析。特别值得关注的是，纳米流式技术可对in vivo CAR-T递送载体（如病毒颗粒、LNP）进行高分辨率的颗粒表征，包括粒径分布、颗粒浓度及空壳率分析，这对于载体质量控制与体内示踪具有重要意义。

驯鹿生物分析方法负责人高会阳老师结合驯鹿生物在CAR-T产品（福可苏^®，全球首个获批的全人源BCMA CAR-T）的成功经验，深入剖析了in vivo CAR-T与传统ex vivo CAR-T在质量控制上的差异。他指出，in vivo CAR-T采用慢病毒载体直接体内递送，其关键质量属性从“总细胞数、CAR阳性细胞数”转变为“滴度、全空壳比、产品/工艺相关杂质”；质量研究面临载体自身特点、规模剂量、创新设计及分析技术不完整等多重难点。他详细拆解了in vivo CAR-T在含量/浓度、纯度/杂质、效力、安全性等方面的核心检测项目，并强调了CMC策略在载体质量与体内安全性评价中的关键作用。

最后，来自Cytiva的mRNA高级工艺流程专家向涛老师系统介绍了Cytiva覆盖质粒生产、mRNA合成（IVT）、层析纯化、LNP包封及超滤换液的端到端解决方案。亮点包括：可在WAVE 25摇摆反应器上实现20-100 mL小体积IVT反应，全自动Unicorn软件确保数据完整性；Fibro^™ dT层析技术基于静电纺丝纤维素纳米纤维，可实现秒级保留时间、高载量（>6 mg/mL）及20次以上循环使用；超滤膜包对比数据显示RC膜材在mRNA-LNP处理中回收率及通量表现优异。此外，Cytiva还展示了新型非PEG稳定剂LNP及靶向CD8的LNP在体内基因编辑与肿瘤杀伤中的初步数据。