破解生物大分子吸附困扰：Altura SEC 色谱柱实现低盐体系优异分离性能背景

盐浓度是 SEC 方法开发的关键变量：低盐环境难以抑制吸附，高盐又容易诱发疏水作用，甚至造成蛋白聚集。样品基质越复杂，越难找到适配广谱样品的缓冲盐条件，给方法开发带来巨大挑战。

案例 1：Altura SEC 300Å，4.6×300 mm，2.7 μm，我们对比了 4 种不同类型的蛋白分子在不锈钢和超惰技术柱管的色谱表现。不锈钢柱管在极低的盐浓度条件下，4 种不同的样品显示出较严重的拖尾，甚至根本没有响应。Altura SEC 超高惰性技术大大减小了样品和金属柱管之间的吸附作用，即使在极低的离子强度条件下，峰型也得到很大改善（图 1）。

图 2 显示了 ADC 样品（戈沙妥珠单抗）的代表性色谱图，使用 Altura 色谱柱，主峰和聚集体峰之间的分离度为 1.41，而不锈钢柱为 1.33，表明分离能力有所提高。同时，使用 Altura 超高惰性色谱柱能够区分二聚体和高聚体，更准确地量化 HMW 聚集，而不锈钢柱无法区分两者。

案例 2：Altura SEC 300Å，7.8×300 mm，2.7 μm，一些样品会体现出较强的吸附问题，在分析时需要使用到较高的盐浓度。如下图案例二数据中，使用不锈钢柱管色谱柱时，流动相体系必须达到 400 mM 氯化钠的盐浓度时，聚集体峰才能获得正常洗脱。对比 Altura 超高惰性柱管，流动相体系降低至 200 mM 盐浓度，即可获得良好的聚集体峰的回收。这一优势，可以减小高盐体系对样品存在的诱导疏水相互作用的风险。同时，减小了高盐体系对于色谱柱和液相系统的损伤。

案例 3：Altura SEC 130Å，7.8×300 mm，2.7 μm，Altura SEC 柱管的超高惰性特点，还能为分析提供快速平衡。针对存在强吸附的样品，使用白介素样品考察色谱柱的重现性。连续 6 针进样，绝对峰面积和峰面积百分比的 RSD 值分别为 0.78% 和 0.81%，显示出惰性柱管优异的重现性。实验证明，针对此类样品，使用 Altura SEC 超高惰性色谱柱无需提前饱和色谱柱和系统，提高检测准确度，同时提升分析效率。