2024-05-10 09:41:37, NanoTemper 诺坦普科技(北京)有限公司
化学计量比计算
使用MST可进行化学计量比的计算,基于的原理是,当target浓度远高于Kd时,结合曲线会出现出现饱和的kink点。kink点对应 target突然被饱和的拐点,如果是1:1结合,kink点对应ligand浓度等于target浓度;若是1:4结合,kink点对应ligand浓度是target浓度的4倍,具体详见FAQ。
图示:Target浓度远高于Kd后,结合曲线出现kink
Step 1:target浓度远高于Kd值进行binding affinity实验,得到带有kink点的饱和曲线,通过该曲线,缩小ligand浓度
Step 2: 使用缩小后的ligand浓度进行binding affinity实验,得到准确的kink点ligand浓度,化学计量比=kink点时ligand浓度/target浓度。
图示:MST检测SA和Biotin结合化学计量比
FAQ 化学计量比计算_Stoichiometry Experiment.pdf
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