2024-04-23 11:24:50, NanoTemper 诺坦普科技(北京)有限公司
初始荧光值无规律变化
由于每根毛细管内Target荧光分子数是一样的,因此16根毛细管初始荧光值应该是均一的(允许的波动范围为±20%)。当初始荧光值无规律的不均一(超过20%阈值),可能的原因和建议如下:
1. 样品质量:buffer不合适,造成样品轻微聚集到PCR管底;
2. 耗材有吸附:枪头或者PCR管吸附Target分子;
3. 移液不准确或者未混匀;
4. 移液器不准:确保移液器工作正常,且近期被校准过;
5. 混匀时,用至少一半的体积上下抽吸混匀,将样品彻底混匀;不要用涡旋或者轻弹的方式;
6. 准备不少于10uL Target+10uL Ligand的反应体系。
当某几根毛细管荧光值波动超过±20%,则对应的数据点不能用于分析,需要去掉。
具体详见下篇FAQ
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FAQ 初始荧光值无规律变化_Random Changes in Initial Fluorescence.pdf
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