2023-12-18 17:40:42, BEAVER
高质量质粒DNA对于众多分子生物学技术非常重要,例如克隆、细胞转染、细菌转化、病毒包装、突变、蛋白表达、Southern blot等。目前常用碱裂解法、热裂解法及密度梯度离心法来进行质粒抽提。海狸利用纳米磁珠技术,开发出一款磁珠法质粒提取试剂盒,适用于1-50mL样本的提取。
表1 质粒抽提方法对比
实验样本:大肠杆菌菌液(OD600=2.221,内含pET-28α质粒)
实验方法:用四个不同品牌质粒试剂盒(A、B为磁珠法,C为柱式法,D:海狸磁珠)分别提取1mL、5mL菌液,洗脱体积100μL。
实验结论:紫外分光光度计进行浓度测定及琼脂糖凝胶电泳测试核酸质量。所有品牌中,海狸质粒试剂盒提取质粒总量最高,琼脂糖凝胶电泳核酸条带最亮。
图1 采用不同品牌试剂盒提取1mL和5mL菌液中的质粒,其产物采用Nanodrop检测浓度
图2 不同品牌试剂盒质粒提取产物进行琼脂糖凝胶电泳检测数据
实验样本:大肠杆菌菌液(OD600=2.221,内含pET-28α质粒)
实验方法:用海狸质粒提取试剂盒对5mL、20mL、50mL菌液进行质粒提取,对应洗脱液体积为100μL、400μL、1mL。
图3 海狸试剂盒在不同体积菌液质粒提取
图4 不同体积菌液质粒提取琼脂糖凝胶电泳图
实验结论:使用海狸质粒提取试剂盒对不同体积菌液进行质粒提取,针对小、中、大体积样本,质粒提取量等比增加,且完整度高、无杂带。
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海狸成立于2011年,位于苏州工业园区,是国内最早从事纳米磁性材料技术研发及产业化的企业之一。企业相继入选国家级高新技术企业、苏州工业园区科技领军(纳米专项)苏州市“苏人才计划”和江苏省“双创计划”。
12年专注磁珠技术开发及产业化,向市场提供了近百种纳米磁珠产品。应用方向涉及到分子诊断、免疫诊断食品药品安全监测、环境监测、动物疫病检测、免疫细胞治疗、靶向药物开发和生物科研等领域。
海狸公司已申请专利50余项;国际论文引用600多次;主导发布国际标准1项,参与起草国内标准3项;拥有ISO9001和ISO13485国际质量管理体系认证取得I类医疗器械产品备案及生产备案近20项并具有II类医疗器械经营资质。
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