ADC药物的CMC监管

1. mAb

监管对ADC抗体中间体和其作为最终DS的要求是一致的，应从表征和质量控制方面对临床前材料和临床材料进行可比性研究。针对mAb中间体的表征包含初级结构（氨基酸序列、N-端/C-端序列分析、肽图）、二级或三级结构、蛋白质碎片（Fragment）/多聚体（Aggregate）、电荷变体（Charge Variant）、糖基化修饰、翻译后的修饰、靶标结合特性和生物活性等。此外，还应对mAb的效应功能以及与Fcγ受体（FcgR）和新生儿Fc受体（FcRn）的结合进行表征，评估mAb中间体对靶细胞信号转导的影响。

目前，大多ADC产品使用lgG1或lgG4抗体。抗体的效应功能和生物活性和ADC的MOA息息相关，应对其进行表征。如对抗体进行修饰以降低效应功能或减少IgG4半抗体的形成，需进一步表征。

此外，需对抗体杂质进行鉴定和表征，包括产品相关杂质（二聚体、多聚体和降解产物等）和工艺相关杂质（细菌、内毒素、HCP、宿主细胞DNA等）。如存在杂质，则需要对其生物活性进行鉴定，并了解其对ADC体内活性的潜在影响。

如对抗体进行修饰，需要进行可比性研究；应采用适当方法对毒理批、临床批和商业批进行可比性研究。

抗体表征：高分辨质谱

抗体杂质：

2. payload-linker intermediate

监管对payload-linker中间体和其作为最终DS的要求是一样的，主要考量包括光学手性、多态性、杂质（产品相关、工艺相关、游离药物及其相关物质、残留溶剂、重金属）、生物活性（靶标特异性结合、亲和力、效应功能）以及效力。

通常情况下，payload和linker被视为起始材料，中间体是二者的组合。需确定起始材料的来源，即毒素来源、发酵来源（如微生物菌株）、天然产物结构改造产生的半合成化合物、肽和化学合成化合物。ADC起始物料的选择通常于EOP2会议和FDA讨论。

此外，应对payload/linker/payload-linker进行结构表征（紫外、红外、核磁共振、质谱、元素分析等），并对表明纯度的稳定性方法进行验证，以确定杂质概况。同样，payload-linker偶联过程中产生的杂质也应进行分析。必须规定减少或去除杂质的工艺，并通过方法验证确定杂质存在的特征。FDA建议在进行关键临床试验之前，对payload-linker中间体的杂质进行表征，并对含量大于0.1%的单个杂质进行结构鉴定。

结构表征：

3. DS

ADC DS的CMC主要考量是结构鉴定和表征、杂质分析和控制。药物分布和DAR是ADC结构表征的重要概念。DAR定义为抗体上偶联药物的平均数量，是ADC的一个重要属性。DAR值会影响药物的疗效。药物负载量低会降低药效，而药物负载量高则会对ADC药代动力学和毒性产生负面影响。

应通过表征证明DS中是否存在药物相关物质、游离毒素、残留溶剂和其他工艺相关杂质（催化剂、金属等）。在IND申请之前，应在临床前毒理学研究阶段对药物相关杂质进行鉴定，并通过上述方法证明临床前毒理学研究的批次与临床材料之间DAR和药物分布特征可比。

残留溶剂：

金属检测

DP

对ADC整体的表征与抗体部分的表征相似，通常只对mAb鉴定而不是payload-linker。虽然ADC的药效取决于payload，但抗原结合对MOA也很重要，未偶联抗体也应与抗原结合，需证明偶联不会影响抗原结合。采用赖氨酸残基偶联后，检测电荷通常意义不大。如果 ADC具有多种 MOA，则均应对其进行表征。mAb、payload或linker发生任何改变，应对DS进行可比性研究。应对毒理批、临床批和商业批进行可比性研究。