2023-10-22 14:57:59 东曹(上海)生物科技有限公司
抗体偶联药物(ADC)是一种将抗癌药物等偶联到抗体中的生物药物,近年来,以ADC和双特异性抗体为代表的新型抗体药物的研发进展迅速,目前全球已有16款ADC药物被批准上市。此外,研发人员还开始探索均一性更高、副作用(脱靶毒性)更少的第三代ADC药物,因此ADC的纯化及质控分析方法将变得日趋重要。
ADC的关键质量属性及其分析法如表1所示。其中,非变性色谱的特点是在分离时可保持抗体的高级结构和活性。在分离药物和抗体的偶联比 (DAR) 不同的成分时,常使用疏水色谱法。
此外,还可以使用挥发性流动相的SEC/MS进行DAR分析1)。作为与抗体ADCC活性相关联的分离,研发人员还探讨了通过亲和色谱法来分离ADC2,3)。另有文献称在抗体、寡核苷酸偶联物 (AOC) 的偶联比分析中使用了阴离子交换色谱 4)。
表1. ADC关键质量属性及其分析法
* MRM: Multiple reaction monitoring
Ref.: G. Petrie et al, White paper, 2017, https://www.eag.com/wp-content/uploads/2018/01/M-028517-Keys-to-Rapid-IND-Submission.pdf
分析ADC时,为了抑制有效载荷偶联而增加的疏水性,即使是在非变性条件下,有时也需要在流动相中添加异丙醇和乙腈等有机溶剂 (5~25%)。
表2中归纳了ADC非变性分析、变性分析的分离模式,以及各自的分离对象和特征。
表2. ADC非变性分析/变性分析的分离模式
尺寸排阻色谱法通常用于分离ADC的二聚体、多聚体和片段。下图是使用TSKgel UP-SW3000分析ADC的谱图。
图2是ADC药物在不同SEC色谱柱上的分离情况比较。相比其他两款SEC色谱柱,TSKgel UP-SW3000在多聚体的分离上可以获得更多组分信息。
在分离药物和抗体的偶联比不同的成分时,常使用分辨率高,非多孔型基质HIC色谱柱。东曹公司最近上市的新型HIC色谱柱TSKgel HIC-ADC Butyl提高了ADC的分离选择性,能够实现更高效的分析。
从谱图中看到,TSKgel HIC-ADC Butyl分离ADC模拟物 (DAR=0,2,4,6,8) 的峰间距更宽,比市售其他品牌的HIC色谱柱具有更宽的分离范围和更出色的分离度。
以上是TSKgel色谱柱在ADC分析中的应用实例,供大家参考。如您有色谱柱选型方面的问题,欢迎随时联系我们!👉东曹技术中心:021-34610856-227
参考文献
1. J. Jones et al., Native size-exclusion chromatography-mass spectrometry: suitability for antibody–drug conjugate drug-to-antibody ratio quantitation across a range of chemotypes and drug-loading levels, MABS, 2020, VOL. 12, NO. 1, e1682895
2. Y. Matsuda et al., Chromatographic analysis of site-specific antibody-drug conjugates produced by AJICAP first-generation technology using a recombinant FcγIIIa receptor-ligand affinity column, J. Chromatogr. B, 1177 (2021) 122753
3. Y. Fujita et al., Glycoform analysis of intact antibodies using FcR column online mass spectrometer, Tosoh Research & Technology Review, 66 (2022) 47-55
4. A. R. Nanna et al., Generation and validation of structurally defined antibody-siRNA conjugates, Nucleic Acid Research, 48 (10), (2020) 5281-5293
01-23 纽迈分析
GE医疗驰援海东地震灾区医疗设备已在医院就位01-22
重磅!全新Ergo KPFM让表面电势的测量简单又准确01-22 牛津仪器
屹尧科技助学金,温暖莘莘学子心01-22 屹尧科技
助力双碳,“氢”心打造-燃料电池汽车用氢质量分析方案(Ⅰ)01-22 飞飞
前沿应用|低场核磁共振技术用于固体药物多晶型的定性与定量研究(二)01-22 纽迈分析
岛津分析客户服务中心升级启航一AI引领向着数字化和自动化演进01-22 仪器信息网
1月23日直播 | 微观与宏观的美丽邂逅——先进金属材料前沿表征技术研讨会01-22 分析中心
哈希京东旗舰店店铺会员日01-22
偏振分光镜产品介绍01-22 韵翔光电
大寒却暖雪晴天01-21
2023元析仪器年会盛典 | 突破·创新,析望无限。01-20 元析仪器
寒气之逆极,故为大寒01-20
擦亮品牌 凝聚力量 | 皖仪科技获“行业先锋品牌”称号01-19 WAYEAL皖仪
【新功能】非靶向代谢组学中的同位素示踪01-19 核磁同位素学社
有奖互动 #谁最爱用过柱机?01-19 市场部
三度蝉联!丹纳赫荣膺“中国杰出雇主”认证01-19
惊!都2024了 还有人不知道儿茶酚胺怎么分析嘛01-19 王静
【视频】Phenomenex科学家话 #SPE的典型步骤 终极目标——“Catch”抓和“Release”放01-19
用户前沿丨清华大学/中科大合作, Science!01-19