多肽分析流程：从手性到反相固定相筛选

2023-10-21 21:17:25, 钟旭 飞诺美


多肽作为由多个氨基酸通过肽键连接而形成的一类化合物，通常由10~100个氨基酸分子组成，具有高活性、低剂量、低毒性等特点，相对于小分子化药，具有更高的活性和更强的选择性。目前，作为多肽主流合成方法的化学固相合成法，具有研发周期短、可快速生产、纯度高的特点，尤其适合中短肽的合成。


多肽药物的分子量大小介于小分子化药和蛋白质药物之间，然而化学合成多肽药物在制备方法、结构确证和质量研究等方面均存在自身特性，无法简单将其归属于小分子化药或生物制品，由此在质量研究方面带来诸多挑战性。艾杰尔飞诺美专注于色谱分析领域解决方案，围绕化学合成多肽药物质量研究提供如下解决方案：


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保护氨基酸手性分析

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多肽有关物质固定相筛选组合


保护氨基酸手性分析

涂敷型和键合型多糖手性固定相，提供广泛对映选择性！

Lux涂敷型和键合型手性色谱柱能够在效果上等同于其他多糖骨架和相似手性选择剂的色谱柱，同时大幅节省成本。在无法实现分离或需要提升分离度时，Lux固定相还能为其他手性选择剂提供补充选择性。



色谱条件：

色谱柱:

Lux 5μm Cellulose-1 250x4.6mm OOG-4458-EO

Lux 5μm Cellulose-2 250x4.6mm OOG-4456-EO

Lux 5μm Cellulose-3 250x4.6mm OOG-4492-EO

Lux 5μm Cellulose-4 250x4.6mm OOG-4490-EO

流速: 1mL/min

柱温: 室温

波长: 220nm

进样体积: 5μL

样品浓度: 2mg/mL (Fmoc保护氨基酸标品溶于甲醇或乙腈, L:D=2:1)


表1. 19种常见Fmoc保护氨基酸手性分析汇总

* 蓝色高亮部分为D型保留时间


图1. FMOC-Asp(OtBu)-OH and FMOC-Tyr(tBu)-OH反相手性分析色谱图


多肽有关物质固定相筛选组合

反相筛选的流程


色谱柱的特点




不同流动相体系实验对比



手性筛分方法开发

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