GPC与光散射检测器联用测定琥珀酰明胶的绝对分子量

2023-10-13 14:26:01 东曹(上海)生物科技有限公司




琥珀酰明胶是通过明胶的琥珀酰化而得到的改性明胶,是临床使用最为广泛的血浆代用品之一,具有扩容和抗休克效果好、免疫源性低及无干涉凝血等优点。主要用于增加血容量,放置失血性休克,降低血液粘度,改善微循环,防止血栓形成等。

本应用将东曹HLC-8320GPC凝胶渗透色谱仪和LenS3光散射检测器联用,配合使用TSKgel G3000SWXL色谱柱对琥珀酰明胶样品的绝对分子量进行测定。




分析条件


仪器:HLC-8320GPC&LenS3

色谱柱 :TSKgel G3000SWXL (7.8 mmI.D. × 30 cm, 5 μm)

流动相 :磷酸盐缓冲液

流速 :1.0 mL/min

进样量 :100 μL

温度 :室温


样品前处理


1)流动相配制:取磷酸二氢钾3.52 g (Mw 136) 12.9 mM、磷酸氢二钠 (Mw 141.959) 8.08 g,28.458 mM,加入2 L超纯水,超声溶解,使用0.22 μm孔径的亲水性过滤膜真空抽滤3遍。

2)样品制备:使用流动相将琥珀酰明胶注射液稀释成浓度约20 mg/mL的溶液,使用0.22 μm孔径,PES材质的亲水性针式过滤器过滤,得到待测样品溶液。


分析结果



图1  琥珀酰明胶多检测器测试谱图

(紫色曲线为示差 (RI) 检测器信号,蓝色曲线为90º角光散射 (RALS) 检测器信号)


图2 琥珀酰明胶的RI (紫色) &RALS (蓝色) 和分子量随流出时间曲线 (绿色) 




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