2023-08-29 13:32:14, 赛默飞生命科学 赛默飞世尔科技生命科学产品
您要做基因表达分析吗?
您处理的是细胞样本吗?
您的实验需要用到RT-qPCR方法吗?
您的样本量多吗?扩增拷贝数低吗?
您想省去RNA纯化步骤吗?
您想要更快完成实验吗?
所有的答案都在Invitrogen™ Cells-to-CT™试剂盒,无需传统RNA纯化即可直接使用培养细胞进行基因表达分析。
传统qPCR检测流程复杂,难以实现高通量和自动化,提取过程易造成降解和损耗造成样品损失,稳定性和准确度不足,尤其是需要平行检测大批的样品。而Cells-to-CT 试剂盒无需RNA纯化,直接检测相对基因表达,更易实现高通量和自动化,样品无损失,结果更稳定,灵敏。
图1.Cells-to-CT试剂盒与传统RT-qPCR检测流程的比较。
新一代 TaqMan™ Cells-to-CT Express试剂盒,对工作流程和试剂进行了重大改进,无需终止液,帮助客户节省时间和成本,并减少塑料废弃物。采用改进的逆转录酶,可以更快速、更灵敏地检测高丰度或稀有转录本。70分钟即可完成从细胞裂解到RT-qPCR步骤。提供了适用于少量样本的简单工作流程,也可轻松整合至自动化的高通量应用中。
TaqMan™ Cells-to-CT™ Express试剂盒
货号:A57987
快速—5分钟样品制备,包括室温下进行 DNase处理
简便—无需RNA纯化,可直接在试管或培养板中裂解样品
稳健—可以从10到10⁵个细胞中获得一致的准确性、可重复性和灵敏度
环保—试剂盒符合 REACH 标准,更少组分,更少移液步骤,减少耗材成本和废弃物
简化实验流程
TaqMan Cells-to-CT Express试剂盒只有5种组分。在短短5分钟内,裂解程序可为 RT-qPCR 制备细胞裂解物,同时去除基因组 DNA。约 70 分钟即可获得基因表达分析所需的 RT-qPCR 结果。
图2. TaqMan Cells-to-CT Express试剂盒工作流程。
更高灵敏度
TaqMan Cells-to-CT Express试剂盒跳过传统RNA纯化步骤,不会丢失RNA,细胞裂解后直接使用SuperScript IV VILO 预混液进行逆转录。细胞裂解物可达RT反应体积的 45%,相比其他试剂盒的10%,可更大限度提高灵敏度。Cells-to-CT Express试剂盒的RT-qPCR结果比传统柱法RNA纯化显示出更低的CT值,特别是在低细胞密度时,灵敏度更高。
图3. 10 – 10,000个HeLa细胞的基因表达分析结果显示,Cells-to-CT Express裂解物比传统柱法RNA纯化CT值更低,特别是在低细胞密度时。
结果一致性
TaqMan Cells-to-CT Express试剂盒可以在各种基因/分析中使用,并且仍然获得一致的结果。96-TaqMan检测结果显示,Cells-to-CT Express试剂盒与使用柱法提取纯化RNA的传统检测方法性能相当。
图4. 96-TaqMan分析,比较TaqMan Cells-to-CT Express试剂盒与使用纯化RNA的传统方法的性能。从10,000个HeLa细胞中获得裂解液。
环保&自动化
TaqMan Cells-to-CT Express试剂盒符合 REACH 法规(《化学品注册、评估、授权和限制》的简称,欧盟为改善环境和保护人类健康而制定的法规),更少组分,更少移液步骤,与传统柱法RNA纯化方法相比,减少92.4%的塑料废弃物。裂解程序完全在室温下进行,可通过自动化平台轻松实现自动化操作,适用于高通量、自动化基因表达分析。
图5. 使用TaqMan Cells-to-CT Express试剂盒和传统柱法纯化RNA进行8个样品的测试所产生的塑料废弃物比较。
无需RNA纯化,样本到结果只需三步
更少步骤,更少实验废弃物
优化试剂配方,提高检测灵敏度
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