2023-08-27 13:53:21 东曹(上海)生物科技有限公司
乌司他丁是肝脏分泌的一种具有广谱蛋白酶抑制作用的酶蛋白。属于人体内源性抗炎物质,能够抑制胰蛋白酶、α-糜蛋白酶和粒细胞弹性蛋白酶等多种蛋白水解酶的活性,促进酶的降解。
注射用乌司他丁是从新鲜人尿中分离纯化的尿胰蛋白酶抑制药,为糖蛋白,含有143个氨基酸,相对分子质量约67000,是一种典型的Kuniz型的蛋白酶抑制药,目前临床上广泛应用于急慢性胰腺炎,各种休克及各种大手术时的脏器功能保护。
注射用乌司他丁在水溶液中稳定性差,为了确保药品的质量,本应用中作者采用尺寸排阻色谱柱TSKgel G3000SWXL建立了测定注射用乌司他丁中乌司他丁的含量的方法。
分析条件
色谱柱:TSKgel G3000SWXL(7.8 mmI.D×30 cm)
流动相:[0.001 mol/L磷酸二氢钠-0.001 mol/L磷酸氢二钠(39:61)]-乙腈(90:10)
流 速:0.7 mL/min
柱 温:25℃
进样体积:20 μL
检测器:UV@280 nm
分析结果
图1 乌司他丁(标准品)分离谱图
图2 乌司他丁(样品)分离谱图
结果与讨论
采用TSKgel G3000SWXL色谱柱建立测定注射用乌司他丁含量的方法,见分析谱图。考察线性关系,结果表明:乌司他丁在0.78125~ 50.00 U范围内与其峰面积有良好的线性关系,制备高、中、低浓度的乌司他丁标准品溶液 (1250, 625, 312.5 U·mL-1) 各3份,同日测定并连续测定5 d,日内、日间精密度RSD均在1%以下。3次加样回收率控制在100.21±0.08%以内。以上结果说明该方法适合注射用乌司他丁中乌司他丁含量的测定。
参考文献
[1] 甘惠贞,林淑瑜,潘丹婷,杨昌云,高效液相凝胶过滤色谱法测定注射用乌司他丁中乌司他丁的含量 医药导报. 2015,34(6):814-12.
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