2023-08-25 12:17:03, 基泰生物 上海基泰生物科技有限公司
1、固定相的选择
固定相类型:
气-固色谱:固体吸附剂
气-液色谱:固定液与载体
固定相种类的不同,直接影响到样品中各组分分离效果优劣。
固定相的选择一般按照“相似相溶原理”。
常用固定液:
固定相液的选择:
分离非极性物质,一般选用非极性固定液。
分离极性物质,一般按极性强弱来选择相应极性的固定液。
分离非极性和极性混合物时,一般选用极性固定液。
能形成氢键的试样,一般选用氢键型固定液。
对于复杂组分,一般可选用两种或两种以上的固定液配合使用。
2、载气种类的选择
载气种类的选择应考虑三个方面:载气对柱效的影响、检测器要求及载气性质。
(1) 载气摩尔质量大,可抑制试样的纵向扩散,提高柱效。
(2) 载气流速较大时,传质阻力项起主要作用,采用较小摩尔质量的载气(如H2、He),可减小传质阻力,提高柱效。
(3) 在载气选择时,还应综合考虑载气的安全性、经济性及来源是否广泛等因素。
载气的选择与检测器有关:
TCD一般选用氢气或氦气做载气
FID 一般选氮气和氩气做载气
ECD 一般选氮气做载气
FPD 一般选氮气做载气
3、载气流速的选择
根据公式,绘制H~u曲线,以实现最佳载气流速的获取,实际载气流速的选择。
在曲线的最低点,塔板高度H最小(Hmin),此时柱效最高。与H最小所对应的流速为最佳流速uopt
4、柱长和内径的选择
柱长增加,分离度增大,对分离有利。但柱长增加也使传质阻力增大,色谱峰区扩展加剧,分析时间延长。因此,在确保一定分辨率的条件下应尽可能使用短色谱柱。
填充柱:柱长1~5 m,柱内径2~6 mm。
毛细管柱:柱长20~200 m,柱内径0.1~0.5 mm。
5、柱温的选择
柱温对分离度的影响比较复杂。兼顾分离度和分析速度两个方面。
(1)柱温升高,被测组分的挥发度↑,即被测组分在气相中的浓度↑,tR↓,改善气相和液相的传质速率,有利于提高柱效,但低沸点组份峰易产生重叠。
(2)柱温降低,分离度↑,分析时间↑。对于难分离物质对,降低柱温虽然可在一定程度内使分离得到改善,但是不可能使之完全分离。这是由于两组分的相对保留值增大的同时,两组分的峰宽也在增加,当后者的增加速度大于前者时,两峰的交叠更为严重。
(3) 柱温选择:接近或略低于组分平均沸点时的温度。
沸点 | 柱温 | 固定液用量 |
气体 | 室温~100℃ | 20-30:100 红色担体 |
100~200℃ | 150℃ | 10-20:100 红色担体 |
200~300℃ | 150~200℃ | 5-10:100 白色担体 |
300~400℃ | 200~250℃ | 1-5:100 白色或玻璃担体 |
(4)组分复杂:宽沸程的试样,采用程序升温。
采用程序升温的方法能兼顾高、低沸点组分的分离效果和分析时间,使不同沸点组分基本上都在其较合适的平均柱温下进行分离。
程序升温条件:升温方式;起始温度;升温速度;终止温度。
6、进样条件和进样量的选择
进样速度越快越好,这样可使样品汽化后能立即被载气带入色谱柱中。若进样时间过长,试样原始宽度变大,流出峰宽也必然变宽甚至发生峰变形。液体试样量一般进样0.1~5 uL,气体试样0.1~5 mL。进样量大,会使几个峰重叠在一起分离不好;但进样量太少,又会使含量少的组分因检测器灵敏度不够而检不出。最大允许的进样量,应控制在峰面积或峰高与进样量呈线性关系的范围内。
7、气化室和检测器温度的选择
气化室温度的选择:
(1)原则是保证样品,同时不分解
(2)一般比样品组分最高沸点高30-50度或比柱温高30-70度。
检测器温度的选择:一般比柱温高30-50度。TCD要求温度恒定,FID要求温度>120度。
03-22 光电行业都会关注
虹科直播 | 发动机失火怎么办?3月28日晚,全国技术能手教你免拆定位故障根源!03-22 虹科Pico示波器
5万亿设备更新大幕开启,屹尧衡昇助您发动创新引擎03-22
响应设备更新政策丨奥谱天成极完善拉曼光谱产品清单请查收03-22
第二届国际单细胞及空间组学大会,3.29青莲百奥邀您共赴鹏城之约!大会门票限量派发→03-22
Opentrons Flex™ 核酸提取工作站:协同工作,助力高质量基因组 DNA 提取与纯化03-22 Opentrons
CACLP 2024 展会速递 | Opentrons 的亮眼表现全在这里了!03-22 Opentrons
更高通量,更智能化 | Opentrons Flex 助力生命科学实验室更新换代03-22 Opentrons
党建活动|高质量党建推动新质生产力发展,全面赋能医疗服务升级03-22
兰友科技与润和软件达成战略合作,助力推进生态环境监测体系数智化建设03-22
精准施力!美析仪器整体解决方案助推新一轮大规模设备更新!03-22 管理员
提能增效|华质 · 原位质谱支持大规模设备更新——选型方案03-22 华质君
行而不止,期待再聚 | 第十八届慕尼黑上海光博会完美落幕03-22 普敦科技
领跑新质生产力 | 普敦科技推出“以旧换新”活动03-22 普敦科技
【文献汇编】NGS助力终结结核病03-22
标准解读 | 世界卫生组织《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录(第2版)》解读03-22 裴少君和欧喜超
天美生命科学实验室设备 | 助力教育科研设备换新03-22 天美
GLMY创想仪器丨携光谱分析仪参加湖北省铸造年会03-22 国产精密仪器厂家
顺磁小课堂第43期 | 为什么同一样品在不同谱仪的测试结果不一致?03-22 CIQTEK
世界水日 | 电子顺磁共振技术为水处理研究提供解决方案03-22 CIQTEK