2023-08-12 13:59:14 东曹(上海)生物科技有限公司
珍珠为珍珠贝科动物马氏珍珠贝等双壳类受刺激形成。珍珠粉含有多种活性成分,包括氨基酸类、牛磺酸、小分子活性肽等活性成分,具有安神定惊、明目消翳、解毒生肌、润肤祛斑等功效。中国是珍珠的主要生产国之一,淡水珍珠养殖产业繁茂,但缺乏规范性管理,产销分离,且珍珠常作为保健产品,需求量大,所以市场上常有以次充好,以假乱真的现象。
本次分享的应用中,作者采用了HILIC色谱柱TSKgel Amide-80的液质联用技术( HPLC-MS/MS) 对不同来源珍珠粉中氨基酸类成分含量进行测定和质量评价。
分析条件
色谱柱:TSKgel Amide-80 (2.0mmI.D.×15cm, 3μm)
流动相A:0.2 %甲酸水溶液
流动相B:乙腈
梯度:0~3/5 min, 60%~80%B; 3.5~4.5 min, 80% B; 4.5~4.6 min, 80%~60% B; 4.6~6.1 min, 60%B
流速:0.2 mL/min
柱温:40℃
进样量:2 μL
质谱条件:正离子, 多反应检测 (MRM), 气帘: 241.32 kPa, 离子化温度: 550 ℃, 喷雾电压: 5500 V
测定方法
以对照品浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,建立回归方程。得到14个氨基酸的线性关系,线性相关系数R范围为:0.9964~1.0000,以3倍信噪比确定方法的检测限范围为:0.0010~0.0228 μg/mL,以10倍信噪比确定为方法的定量限范围为:0.0032~0.0560 μg/mL。平行制备6份供试品溶液计算得到14个氨基酸峰面积的RSD为:1.53%~2.82%,表明该方法重复性良好。
14个氨基酸对照品溶液 (400 ng/mL) 的HPLC-MS/MS (MRM) 色谱图
1. Pro 2. Asp 3. Phe 4. Thr 5. Leu 6. Tyr 7. Ser 8. Val 9.Gly 10.Ala 11. His 12. Lys 13. Glu 14. Arg
结果与讨论
采用TSKgel Amide-80色谱柱液质联用法测定珍珠粉中的氨基酸,可在10 min内完成分离与测定,该方法操作简单、无需衍生化等繁琐操作,快速、线性关系良好,具有较好的重现性和准确度,可以用于珍珠粉中氨基酸类成分的测定及质量评价。
参考文献
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SEC-MALS:让腺相关病毒(AAV)表征更上一层楼东曹GPC用户专访:苏州大学高分子材料与工程部朱健教授请收藏这个书架!产品目录、技术手册、应用数据集在线浏览采用TSKgel DNA-NPR色谱柱分析质粒DNA的拓扑异构体非变性SEC-MS分析单克隆抗体时色谱柱的选择
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