正式实施 | 婴幼儿配方奶粉新国标，检测方法有哪些更新？

GB 5009.82新版征求意见稿《食品中维生素A和E的测定》中，第一法反相高效液相色谱法分析了A顺反式（全反式视黄醇、13-顺式视黄醇）、维生素E的生育酚异构体（α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、α-生育三烯酚）等目标物。

艾杰尔飞诺美选用Kinetex F5成功分离了维生素E的5种生育酚异构体，30分钟内即可完成分析，而且比国标分离度有改善。Kinetex F5五氟苯基基团可以提供包括疏水性作用，π- π相互作用，偶极矩作用，以及氢键等不同的相互作用，所以在异构体分析上有优异表现。

色谱柱：Kinetex F5 4.6×250mm 5μm

P/N：00G-4724-E0

流动相：

A：水

B：甲醇

流速：0.8mL/min

柱温：25℃

波长：294nm

进样量：20μL

表1. 梯度条件

图1. 5种维生素E色谱图294nm

表2. 5种维生素E出峰情况

液相条件：

色谱柱: Lux™ 5µm Cellulose-1

（Size: 4.6×250mm, P/N: 00G-4459-E0）

保护柱套: P/N: KJ0-4282

保护柱芯: P/N: AJ0-8403

流动相: 乙腈：水=83: 17（v/v）

流速: 1.0mL/min

进样量: 10µL

波长: PDA 294nm

温度: 25℃

图2.  d-α-生育酚测试谱图

表3. d-α-生育酚分析结果

图3.  dl-α-生育酚测试谱图

（dl-α-生育酚组分峰1；dl-α-生育酚组分峰2）

表4. dl-α-生育酚分析结果

图4. 婴幼儿配方奶粉中的维生素B1

液相条件 ：

色谱柱：Venusil^® XBP C18(2)，4.6×250mm，

100Å，5μm（P/N:VX952505-2）

流动相：0.05mol/L 乙酸钠溶液︰甲醇= 65︰35

荧光检测器检测波长：激发波长375nm，发射波长435nm

流速：1.0mL/min

进样量：10μL

图5. 婴幼儿配方奶粉中的维生素B2

液相条件 ：

色谱柱：Venusil^® XBP C18(2)，4.6×150mm，

100Å ，5μm（P/N:VX951505-2）

流动相：0.05mol/L 乙酸钠溶液︰甲醇= 65︰35

荧光检测器检测波长：激发波长462nm，发射波长522nm

流速：1.0mL/min

进样量：10μL

图6. 婴幼儿配方奶粉中的维生素B6

液相条件 ：

色谱柱：Venusil^® XBP C18(2)，4.6×150mm，100Å，5μm（P/N:VX952505-2）

流动相：甲醇50mL，辛烷磺酸钠2.0g，三乙胺2.5mL，水定容至1000mL，冰乙酸调pH为3.0±0.1

荧光检测器检测波长：激发波长293nm，发射波长395nm

流速：1.0mL/min

进样量：10μL

图7. 婴幼儿配方奶粉中的烟酸

液相条件 ：

色谱柱：Venusil^® XBP C18(2)，4.6×250 mm，100Å，5μm（P/N:VX952505-2）

流动相：甲醇70mL，异丙醇20mL，庚烷磺酸钠1g，用910mL水溶解并混匀后，用高氯酸调pH至2.1±0.1，经0.45μm微孔滤膜过滤

紫外检测器检测波长：261nm

流速：1.0mL/min

进样量：10μL

图8. 婴幼儿配方奶粉中的牛磺酸

液相条件：

液相色谱柱：Venusil^® XBP C18(2)，4.6×250mm，100Å，5μm（P/N:VX952505-2）

流动相：10mM

乙酸钠缓冲溶液（pH为4.2）︰乙腈=70︰30（V/V）

波长：254nm

流速：1.0mL/min

进样量：20μL

图9 5种核苷酸混标高效液相色谱图

色谱条件：

色谱柱：Venusil^® C18 Plus；5μm，120Å，4.6×250mm；（P/N:VPS952505-A）

流动相：称取1.360g磷酸二氢钾，加0.4753g四丁基硫酸氢铵至1000mL容量瓶中，用水补齐至刻度，准确加2.5ml磷酸和40mL甲醇，混匀后超声10min

（备注：由于流动相中含离子对试剂，色谱柱需要先用流动相平衡至少90min后，再运行4针标准品，系统才能稳定） 

波长：254nm

柱温：30℃

流速：1.0mL/min

进样量：10μL

图10. L (+)-抗坏血酸和D (+)-抗坏血酸50 μg/mL标准溶液液相色谱图

液相条件 ：

色谱柱：Venusil^® C18 Plus，5μm，120Å，4.6×250mm（P/N:VPS952505-A）

流动相：

A: 6.8g磷酸二氢钾，用水溶解并定容至1L (用磷酸调pH 至2.5 ~ 2.8) 

B:100%甲醇

按A∶B=98∶2混合，过0.45 μm 滤膜，超声脱气

流速：0.7mL/min

柱温：25℃ 

进样量：20μL

检测波长：245nm

图11. 奶粉样品维生素K1色谱图

液相条件：

色谱柱：Venusil^® C18 Plus，5μm，120Å，4.6×250mm （P/N:VPS952505-A）

锌还原柱：粒径50~70μm，柱长50mm，

内径4.6mm；（P/N:VZN9600505-0）

流动相：甲醇900mL，四氢呋喃100mL，冰乙酸0.3mL，混匀后，加入氯化锌1.5g无水乙酸钠0.5g，超声溶解后，用0.22μm有机系滤膜过滤

流速：1mL/min

柱温：30℃ 

进样量：10μL

检测波长：激发波长243nm，发射波长430nm