【海能实验室】膳食纤维测定仪测定可溶性、不可溶性及总膳食纤维含量

2024-05-24 18:39:26 海能未来技术集团股份有限公司


experiment

食纤维

海能实验室

在追求健康生活的今天,大豆及豆制品

因其丰富的营养价值和多样的烹饪方式

逐渐成为人们的选择。

大豆膳食纤维粉

是一种常见的食品原料,

含有丰富的

可溶性和不可溶性膳食纤维,

还含有丰富的氨基酸和少量植物脂肪。

测定大豆膳食纤维粉的膳食纤维含量

对于其质量把控、食效分类

具有重要意义。

本方案使用DF06膳食纤维测定仪

对大豆膳食纤维粉进行测定。

PART 01

实验方案

instrument

仪器  

DF06膳食纤维测定仪

K1100全自动凯氏定氮仪

马弗炉

分析天平

……

实验过程  

仪器准备

1、将滤膜编号,于105℃烘箱中烘干至恒重并称重为MG后,安装于过滤漏斗中,并安装至仪器相应位置处。

2、移取350 μLl的热稳定淀粉酶溶液,溶于盛有50 mL的顺丁烯二酸缓冲液的酶瓶中;移取3.5 mL的10 mg/mL蛋白酶溶液,溶于盛有47 mL的顺丁烯二酸缓冲液的酶瓶中;移取700 μL的葡萄糖苷酶溶液,溶解于盛有50 mL的顺丁烯二酸缓冲液的酶瓶中,然后将酶瓶安装至仪器相应位置处。

3、将酶解袋装于仪器相应位置处。

4、确保95%乙醇、纯水、顺丁烯二酸缓冲液、醋酸溶液的对应试剂桶中试剂充足,然后将其与对应接头连接。

样品制备

本方案采用SOX606索氏提取仪进行样品的脱脂处理。

精确称取混匀后的样品10~12 g(精确至0.1 mg)左右,记为MC。将称好的样品转移至滤纸筒中。将盛有样品的滤纸筒置于仪器萃取室内,向溶剂杯中加入沸程30~60℃的石油醚,仪器参数设置如下:

萃取模式萃取时间萃取温度试剂

添加量

预干燥

时间索氏标准

270 min

65℃

100 mL

30 min

抽提完成后,将残渣烘干至恒重,记为mD。

总膳食纤维测定

1、设定酶解程序如下:

热稳定α-淀粉酶反应时间/min

40

95%乙醇沉淀用量/mL

250

淀粉葡萄糖苷酶反应时间/min

30

沉淀时间/min

60

蛋白酶反应时间/min

30

78%乙醇洗涤用量/mL

15

乙酸加液量/mL

3.0

95%乙醇洗涤用量/mL

15

抽滤方式

抽滤时间/min

20

2、在运行-第一法中选定设定酶解程序,开始运行,并按照步骤将酶解袋安装至仪器对应位置处,然后按照步骤提示将样品倒入酶解袋中。(注意避免样品粘在酶解袋内壁高于上压条的未知,否则应用带针头的注射器吸取缓冲液将样品冲入酶解袋,冲洗体积不超过两毫升)。

3、仪器自动进行酶解、乙酸溶液添加。然后根据弹窗提示测定(或需添加1 mol/L氢氧化钠溶液或乙酸溶液调整)空白、样品的pH值为4.3±0.2,然后

4、仪器自动进行沉淀、抽滤,得到滤液与TDF的残渣,将附有残渣的滤纸取出,按照十字折叠后放置于样品架上,在105℃烘箱中烘干至恒重(至少需4小时)并称重为MGR。

5、每两份残渣中,一份按照国标《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》第一法进行消解(推荐试剂量为硫酸铜0.2 g、硫酸钾3 g、硫酸20 mL,420℃下保温时间至少为3小时),蒸馏、滴定,计算蛋白质质量MP;另一份置于马弗炉中,于550℃下灰化3h测定灰分,计算灰分质量MA。

不可溶性膳食纤维及可溶性膳食纤维测定

1、设定酶解程序如下:

热稳定α-淀粉酶反应时间/min

40

H2O(洗涤)/mL

10

淀粉葡萄糖苷酶反应时间/min

30

抽滤时间/min

5

蛋白酶反应时间/min

30

95%乙醇沉淀用量/mL

330

乙酸加液量/mL

3.0

沉淀时间/min

60

不可溶抽滤方式

不可溶抽滤时间/min

5

可溶抽滤方式

可溶抽滤时间/min

20

2、在运行-第一法中选定设定酶解程序,开始运行,并按照步骤将酶解袋安装至仪器对应位置处,然后按照步骤提示将样品倒入酶解袋中。(注意避免样品粘在酶解袋内壁高于上压条的未知,否则应用带针头的注射器吸取缓冲液将样品冲入酶解袋,冲洗体积不超过两毫升)。

3、仪器自动进行酶解、乙酸溶液添加。然后根据弹窗提示测定(或需添加1mol/L氢氧化钠溶液或乙酸溶液调整)空白、样品的pH值为4.3±0.2,然后

4、仪器自动进行抽滤,得到滤液与ISDF的残渣,将附有残渣的滤纸取出,按照十字折叠后放置于样品架上,在105℃烘箱中烘干至恒重(至少需4小时)并称重为MGR。

5、将过滤漏斗的外斗装回仪器对应位置,

6、沉淀完成后,在仪器上换装另一套装有恒重好的滤膜的漏斗及烧瓶,将沉淀好的溶液摇匀并倒入新的漏斗中抽滤。抽滤完成后,按照十字折叠后放置于样品架上,在105℃烘箱中烘干至恒重(至少需4小时)并称重为MGR。

7、每两份残渣中,一份按照国标《GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》第一法进行消解(推荐试剂量为硫酸铜0.2 g、硫酸钾3 g、硫酸20 mL,420℃下保温时间至少为3小时),蒸馏、滴定,计算蛋白质质量MP;另一份置于马弗炉中,于550℃下灰化3h测定灰分,计算灰分质量MA。

结果、讨论与注意事项  

1、实验结果

实验选取的大豆膳食纤维粉样品经酶解、抽滤、烘干恒重、测定蛋白和灰分后,得到实验结果如下表所示,其中不可溶性膳食纤维(ISDF)的结果如下:

样品

称样量/g

残渣/g

残渣蛋白质/g

残渣灰分/g

ISDF含量/%

均值/%

大豆膳食纤维粉

0.5064

0.3748

0.0303

_

65.630

64.586

0.5017

0.3587

_

0.0037

0.5009

0.3494

0.0232

_

65.543

0.5052

0.3531

_

0.0065

0.0000

0.0025

0.0015

__

0.0000

0.0043

_

0.0000

_

可溶性膳食纤维(SDF)含量如下表:

样品

称样量/g

残渣/g

残渣蛋白质/g

残渣灰分/g

SDF含量/%

均值/%

大豆膳食纤维粉

0.5064

0.0580

0.0116

_

7.125

7.314

0.5017

0.0563

_

0.0020

0.5009

0.0625

0.0152

_

7.503

0.5052

0.0641

_

0.0027

0.0000

0.0129

0.0053

__

0.0000

0.0130

_

0.0000

_

2、讨论

总膳食纤维(TDF)为ISDF与SDF的加和,测得该大豆膳食纤维粉的总膳食纤维含量为71.090%。  

3、注意事项

大豆膳食纤维粉可部分残留于称量纸上,必要时可用不超过2 mL缓冲溶液冲洗,洗液一并转移至酶解袋中。

DF06膳食纤维测定仪

随着人们越来越注重饮食健康,更多人关注到膳食纤维这一指标。根据《中国居民膳食指南》要求,每日需摄入25-30g 膳食纤维,在日常选购商品时,大家也可关注“增加膳食纤维”等标注。

自动膳食纤维测定仪可一键化完成酶解、沉降、洗涤等过程,以自动化操作替代繁琐人工,有效提高实验效率。DF06膳食纤维测定仪高效自动、精准可靠、简便友好、安全合规,主要应用于食品中总膳食纤维、可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维等指标的检测。


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