干细胞培养（干货集锦二）——如何正确选择基质

2023-02-16 13:08:23, 赛默飞生命科学赛默飞世尔科技生命科学产品

在上一期的的干细胞培养中，我们已经向大家介绍了如何选择培养基，（往期回顾：干细胞培养系统选择指南）。今天，让我们来一起来学习如何正确选择基质，以获得更好的干细胞培养效果。

Gibco™产品(包括细胞外基质、三维支架和粘附蛋白)是提升细胞功能的基本工具，可提供更类似体内的形态、生理学相关的环境及更佳的细胞内相互作用。

✦ 细胞粘附必需的成熟技术

✦ 批次间产品一致性，使用方便，可靠性更高

✦ 适合各种应用领域，包括肝脏和皮肤生物学、干细胞研究、神经科学和肿瘤学

Geltrex 基质产品

（该产品低价促销正在进行中）

Geltrex™基质产品为可溶性的低生长因子(RGF)基底膜提取物(BME)，从小Engelbreth-Holm-Swarm肿瘤中纯化而来。所有Geltrex™产品均不含乳酸脱氢酶增高病毒(LDEV)，适用于所有类型的细胞培养和小鼠体内研究。此外，批次间一致的蛋白质浓度及功能测试有助于降低细胞培养实验的差异性。

(A) 内皮细胞管道形成的代表性荧光(钙黄绿素AM染色)和(B)相差图。Geltrex™是一种基底膜提取物，可诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)重组为三维毛细管样的结构。

人重组层粘连蛋白 ( rhLaminin-521)

层粘连蛋白是基底膜中主要的糖蛋白组分，其调控的功能包括细胞粘附、伸展、生长及移动，促进上皮分化，白细胞功能修饰并刺激神经突触的生长。其中，人重组层粘连蛋白521 （rhLaminin-521）专门针对无滋养层多能干细胞的培养。当与Essential 8™培养基一起使用时，rhLaminin-521可以在缺乏小分子抑制剂的压力条件下促进细胞存活。PSC传代20次后无任何核型异常迹象，并维持PSCs向所有三种种系分化的能力。rhLaminin-521还提供了最佳的人体细胞重编程效率，如下图所示。

图.rhLaminin-521提供了更高的体细胞重编程效率。在Gibco培养基106 (货号M106500) 及低血清生长添加剂 (LSGS，货号：S00310) 上扩增人皮肤成纤维细胞(新生儿)。然后使用CytoTune-iPS 2.0仙台病毒重编程试剂盒，以5:5:3的感染复数(MOI)在基于KnockOut血清替代物的培养基中重编程细胞。转导后第7天，将新的重编程的成纤维细胞传代至rhLaminin-521(货号：A29248)或 rhVTN-N(货号：A14700)基质上，每天添加Essential 8培养基 (货号：A15170)。转导后第21天，确定每种条件下的碱性磷酸酶阳性集落的数量 (每种条件下n = 3)。(A)代表性的碱性磷酸酶图像。(B) 柱形图显示了在rhVTN-N和rhLaminin-521条件下获得的碱性磷酸酶阳性集落的数量。

玻连蛋白 (Vitronectin, VTN-N)

玻连蛋白(VTN-N)是一种重组人蛋白，可为人多能性干细胞的无滋养层培养提供成分限定的表面。VTN-N与Essential 8™培养基结合使用，可维持多种PSC细胞系的多能性及正常的生长特性。此外，利用VTN-N可进行50代以上的PSC培养，而细胞无任何核型异常征象，并可维持PSC向所有三个胚系谱系分化的能力。