水果中4,6-二硝基邻甲酚残留量的测定

2022-11-16 18:00:52 月旭科技（上海）股份有限公司

1、适用范围

本标准适用于苹果、梨中水果中4,6-二硝基邻甲酚残留量的检验，其他食品可参照执行。（本实验样品为苹果）

参考标准：《GB 23200.27—2016 食品安全国家标准水果中4,6-二硝基邻甲酚残留量的测定》

2、提取步骤

样品前处理：将样品经搅拌机搅碎，冷藏保存，备用。

准确称取1 g试样（精确至0.01g）于15 mL离心管中，加入3g无水硫酸钠和5mL二氯甲烷，在漩涡混合器上充分混匀3min，并于4000r/min离心5min，将提取液转移至另一个15mL离心管中，残渣用5mL二氯甲烷重复提取一次，合并提取液，于50℃氮吹浓缩至干。

3、衍生化

残渣于离心管中加入0.4mL乙腈溶解，再加入100μL衍生化试剂MTBSTFA（N-叔丁基二甲基甲硅烷基-N-甲基三氟乙酰胺），封口，80℃下恒温衍生化1h。取250μL标准工作液加入100μL衍生化试剂MTBSTFA和150μL乙腈，封口，在上述条件下进行衍生化。衍生化后的溶液过0.22μm的微孔滤膜，供气相色谱-质谱联用仪使用。

4、色谱条件

气相色谱条件

色谱柱：WM-5MS，30m×0.25mm×0.25μm；

进样口温度：210℃；

升温程序：100℃，保持1min，以30℃/min升温至180℃，保持1min，以50℃/min升温至205℃，再以10℃/min升温至260℃，保持20min；

载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；

进样方式：不分流进样；

恒流模式：1.0mL/min；

进样量：1μL

质谱条件

电离方式：电子轰击电离源（EI）；

电离能量：70eV；

传输线温度：250℃；

离子源温度：230℃；

四极杆温度：150℃；

监测方式：选择离子监测方式（SIM）；

监测离子：m/z 255/209/239/179；

溶剂延迟：5min；

5、色谱图或者加标回收率结果

图1. 4,6二硝基邻甲酚0.5μg/mL图谱

表1、出峰情况

物质	保留时间	类型	峰宽	面积	开始时间	结束时间
4,6二硝基邻甲酚	9.897	M	0.021	5701	9.869	9.927

图2. 梨样品空白图谱

图3. 梨样品加标0.25mg/kg图谱

表2、加标回收率表

物质	加标水平	平均回收率	RSD值（n=2）
4,6二硝基邻甲酚	0.25mg/kg	104.46%	3.04%

6、相关产品信息

货号	名称	规格
00821-32291	盖子+垫片	Welchrom® 预切口红色特氟龙/白色硅胶隔垫，9mm蓝色短螺纹开口盖中心孔6mm 100pk
00821-40927	样品瓶	Welchrom® 2mL 透明短螺纹广口样品瓶带书写处 11.6*32mm 一级水解玻璃 100pk
03904-22001	气相色谱柱	WM-5MS ,30m×0.25mm×0.25μm
00837-05002	15mL螺口尖底离心管	Welchrom® 离心管一次性离心管，平盖，锥形底,RCF12000xg,袋装,未灭菌，15mL，50/包
00826-D123P050	4,6-二硝基邻甲酚标准品	A2S, CAS No.:534-52-1,50mg