2022-11-16 18:14:32 月旭科技(上海)股份有限公司
背景
叶黄素、玉米黄质、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和番茄红素是天然植物性食品中最为常见的5种类胡萝卜素类营养物质,具有维生素A原活性、抗氧化、参与细胞传递、免疫功能调节与促进、保护皮肤免于紫外线伤害和抑制黄褐斑生成等诸多生理保健功效。
但这5种类胡萝卜素类营养物质的液相色谱同时分离测定一直比较困难,原因是这5种类胡萝卜素类营养物质之间的极性差异比较大,叶黄素和玉米黄质分子结构中有两个羟基,极性较强,在反相液相色谱柱(如C18等)上的保留力较弱,而α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和番茄红素是烃类物质,仅由碳和氢两种原子构成,无任何极性官能基团,极性极弱,在反相液相色谱柱(如C18等)上的保留力极强;另外,更为重要是叶黄素和玉米黄质之间,以及α-胡萝卜素和β-胡萝卜素之间,两两互为同分异构体,相互间仅是一个碳-碳双键的位置差异,液相分离难度大(分子结构详见附录A,特征吸收光谱图详见附录B)。
本应用案例采用月旭科技公司生产的C30反相高效液相色谱柱、两元梯度洗脱,实现了单次高效液相色谱检测对叶黄素、玉米黄质、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和番茄红素这5种类胡萝卜素类营养物质的分离检测,且单次高效液相色谱检测费时为35分钟。
高效液相色谱检测条件
1
仪器设备
Welch 高效液相色谱仪,WiSys5000,配备二级管阵列检测器;
2
液相色谱柱
分析柱:Ultimate XB-C30色谱柱,4.6mm×250mm, 5μm;
保护柱:Ultimate XB-C30,4.6mm×10mm, 5μm;
3
流动相
A相:甲醇:乙腈=1:1;B相:乙酸乙酯;
4
梯度洗脱程序
时间/min011035A %95957820B %552280
5流速
1.0mL/min;
6
检测波长
476nm;
7柱温
30℃;
8
进样体积
20μL。
高效液相分离色谱图
叶黄素、玉米黄质、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和番茄红素高效液相色谱图
从高效液相检测的色谱图看,不仅单次检测,35分钟内实现同时分离检测叶黄素、玉米黄质、α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和番茄红素这5种类胡萝卜素类营养物质,而且互为同分异构体的叶黄素和玉米黄质之间,以及α-胡萝卜素和β-胡萝卜素之间,都基本实现了基线分离。
相关色谱耗材
附录A:5种类胡萝卜素天然营养物质的分子结构
附录B:5种类胡萝卜素天然营养物质的特征吸收光谱图
番茄红素特征吸收光谱图(最大吸收峰2:480nm)
叶黄素特征吸收光谱图(最大吸收峰1:454nm)
玉米黄质特征吸收光谱图(最大吸收峰2:461nm)
α-胡萝卜素特征吸收光谱图(最大吸收峰1:454nm)
β-胡萝卜素特征吸收光谱图(最大吸收峰1:461nm)
06-06 Unimicro
Nature 发文! 如果有一天,线粒体也能被移植……06-06 小 M
实验操作 | 小白第一课!基础细胞培养方法及步骤06-06 小 M
科研助攻 | Nature Review:癌症治疗抗体药物最新综述06-06 小 M
端午礼遇 | 玩游戏,选周边,宠粉福利,只 "粽" 意 你~06-06 小 M
发货通知 | MCE 中国祝大家端午安康06-06 小 M
“岛津森林”项目06-05 医疗中心
浙江以检测赋能新质生产力06-05
2025版《中国药典》收官在即,变化要点有哪些?要注意哪些方面?06-05
吸附管采集固定污染源废气中的VOCs时的采样流量要求?06-05 检测家
内卷加剧,检测机构如何破局应对?06-05
【人民日报国际】在收获与播种交织的芒种中国时刻,张轶昊谈创新。06-05
德国元素耗材之星 | 固体压样器/液体封样器06-05
夏日焕新 谱写新章 | 德米特第四届“互动日”惊喜而至06-05
祝贺嫦娥六号月背采样成功 | 盘点标乐助力月球样品分析06-05
2024年德国元素巡检活动 | 第一站:成都站!免费申请06-04
会议通知|第一届小动物活体成像技术前沿与应用网络研讨会06-04
蛋白质组学从发现组学跃入临床怀抱的跨越之旅06-04
内毒素检测的思考 - 采用药典方法同时减少鲎试剂的使用06-04 Sievers分析仪
检测家十周年特惠 | 赛默飞、岛津、沃特世 系列产品租六送一!06-04