2022-11-16 17:08:48 月旭科技(上海)股份有限公司
离子交换色谱分离蛋白质是根据在一定pH条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法,由基体、配基(离子官能团)和反离子三部分组成。
一、基体
基体是填料中的固体支持物部分,赋予填料一定形状,同时让配基固着或键合在上面形成色谱填料。基体一般是多孔的、有一定刚性的固体颗粒。
无机材料比如硅胶和多孔玻璃类基体,耐压高、孔径可控、可制备高效填料,但由于易使蛋白质失活和大孔硅胶价格昂贵而主要用于分析。
有机材料的基体分两类:高分子聚合物和聚多糖类。高分子聚合物主要包括苯乙烯和二乙烯基苯聚合物、聚甲基丙烯酸酯和聚酰胺,耐压较高,但疏水性强,孔径不好控制,一般不用于蛋白质制备。聚多糖类主要包括纤维素、葡聚糖和琼脂糖,这类基体表面电荷呈中性,有大量羟基,亲水性强,生物相容性好,孔径易控制,制得的填料柱容量大,但机械强度差,经过交联后可以使强度提高。
二、配基(离子官能团)
配基是固定在基体骨架上的功能基团,它是带电荷的基团(强离子交换剂)或是在溶液中可以离解成带电荷基团的官能团(弱离子交换剂)。
1. 强阴离子交换剂(SAX)
如带三甲胺基乙基的季铵盐型(简称Q型)。
2. 强阳离子交换剂(SCX)
如磺酸基丙基(简称SP)。
3. 弱阳离子交换剂(WCX)
如羧甲基(简称CM),在一定的pH范围内可离解成羧基阴离子。
4. 弱阴离子交换剂(WAX)
如二乙胺基乙基(简称DEAE),在一定pH范围内可结合质子离解成季氨阳离子。
三、反离子
与带电功能基团带相反电荷,可以移动,能与带电样品分子进行交换的离子称为反离子或抗衡离子(也称为平衡离子)。反离子与固定的带电基团的电荷相反,二者之间以静电力相结合。反离子的存在有两种情况:在强离子交换剂中它已存在;在弱离子交换剂中反离子要在一定的pH溶液中才离解形成。
四、月旭离子交换层析介质
Q/SP/DEAE/CM Tanrose FF
快流速琼脂糖基架离子交换介质
技术参数:
名称Q
Tanrose
6FF
SP
Tanrose
6FF
DEAE
Tanrose
6FF
CM
Tanrose
6FF
基质类型
6%琼脂糖
平均粒径&
粒径范围
90μm,45-165μm
配基密度
180-
250μmol
Cl-/mL
180-
250μmol
H+/mL
110-
160μmol
Cl-/mL
90-
130μmol
H+/mL
功能基团
季氨基
磺丙基
二乙基氨基乙基
羧甲基
工作流速
50-300cm/h
pH
稳定性
2-12 (长期)
2-14 (短期)
4-13 (长期)
2-14 (短期)
2-9
(长期)
6-10
(长期)
化学
稳定性
2M NaOH、70%乙醇、30%异丙醇、30%乙腈、1%SDS、6M盐酸胍、8M尿素
储存溶液
及温度
20%乙醇
4-30℃
20%乙醇
0.2M醋酸钠
4-30℃
20%乙醇
4-30℃
20%乙醇
4-30℃
以及:
Q/SP Tanrose HP 高分辨率琼脂糖基架离子交换介质;
Q/SP Tanrose XL 高载量琼脂糖基架离子交换介质;
Q/SP Tanrose BB 大颗粒琼脂糖基架离子交换介质;
Solid Q/S/DEAE 高刚性琼脂糖基架离子交换介质;
Solid MMC 复合型弱阳离子交换介质;
Solid MIX A 复合型强阴离子交换介质;
DEAE/CM Tandex 葡聚糖基架离子交换介质。
“月旭专家讲座”
2021年11月20日
“月旭专家讲座”我们邀请到了分子印迹技术权威专家,从事分子印迹材料及应用技术研究十几年的中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所的佘永新主任,和大家聊一聊“分子印迹技术在样品前处理领域的应用”。
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