应用分享｜药物研发初期抗体糖链结构的快速分析方法
2022-11-04 18:07:04 东曹（上海）生物科技有限公司
N-聚糖的结构不同，会对抗体药物的药效、安全性等质量属性带来很大影响。此外，细胞培养工艺条件稍有不同也会导致糖链结构发生变化。已有报告指出，不同细胞株表达的抗体N-聚糖的结构及物理性质存在差异。所以糖链分析在药物的质量控制中非常重要。
在学术期刊Biotechnology Progress（生物技术进展）上发表的文章 "Highly sensitive HPLC analysis and biophysical characterization of N-glycans of IgG-Fc domain in comparison between CHO and 293 cells using FcγRIIIa ligand" 中，作者利用Expi293 (HEK293) 细胞和ExpiCHO (CHO) 细胞这两种不同细胞株表达单克隆抗体，并使用了亲和色谱柱TSKgel FcR-IIIA-NPR进行分析比较，结果显示两者的分离表现有很大不同。这是由于IgG-Fc区域的末端糖链 (半乳糖残基) 不同导致的。
Ref.: H. Kosuge et al., Biotechnol. Progress, 2020;e3016, https://doi.org/10.1002/btpr.3016
图1 Expi293和ExpiCHO细胞表达利妥昔单抗和
曲妥珠单抗的分离谱图
表1 Expi293和ExpiCHO细胞表达利妥昔单抗和曲妥珠单抗糖型分析结果
如图1所示，不同细胞表达系统获得的单克隆抗体的色谱保留存在显著性差异。相比ExpiCHO细胞表达的曲妥珠单抗，Expi293细胞表达的利妥昔单抗在FcR-IIIA-NPR色谱柱上保留强组分所占比例相对较高。这表明是糖基化行为的不同所导致的，所用的细胞株不同，N-聚糖的糖基化行为也会有所不同。
进一步糖型分析实验结果表明：Expi293细胞表达系统制备的抗体中IgG-Fc区域聚糖末端含有半乳糖残基的糖型所占比例明显较高（见表1）。
因此，在单抗药物的研发初期阶段，TSKgel FcR-IIIA-NPR色谱柱可作为一种简易方法，来确认不同细胞株表达的抗体糖链结构差异。
1、不同细胞株表达的抗体糖链差异的分析
2、多个细胞株筛选时确认抗体性状的变化
3、细胞培养基中添加剂的优化探讨
4、细胞培养过程中培养天数与抗体糖链性状的变化关系分析
5、细胞培养规模放大或更改培养方法时，确认抗体糖链性状是否发生变化
使用G3000SWXL色谱柱测定双特异性抗体药物浓度
色谱柱性能再升级，完美解决生物大分子UHPLC-SEC分析难题
参考国标GB/T 41436-2022测定指画颜料中三氯生和三氯卡班
使用尺寸排阻色谱柱G6000PWXL-CP分离mRNA-LNP
Tosoh Bioscience网络研讨会视频资源库上线了！
03-14 NanoTemper
ICP-MS技术漫谈V--碰撞/反应池CCT技术之于icpTOF：复杂基体高时间分辨率测量中充分非必要之选03-13 Marcel Burger等
媒体报道 | 亦庄融媒采访卓立汉光：如何推动产品迭代促进订单增长？03-13 光电行业都会关注
邀请函 | 卓立汉光亮相2024慕尼黑光博会，3月20日上海见！03-13 光电行业都会关注
解决方案 | 可见近红外光纤光谱仪在透射率应用中的示例03-13 奥谱天成
热点应用 | 复旦大学张凡团队开发具有高亮度和长血液循环时间的近红外二区刷状大分子荧光探针用于肾脏疾病检测03-13
体外诊断试剂量值溯源的实施方案及关键要素（上篇）03-13
【知识库 · 转载】晶型定性定量研究知多少？03-13
【两会热点】快速响应国家号召，支持医药行业分析设备以旧换新03-13
【热点应用】高数据质量的XRD指导新药研发和制剂晶型研究03-13 陈丽
XRD软件应用技巧 | XRDML数据格式转换03-13 朱晓东
国仪量子携手清华磁共振实验室为您答疑解惑！顺磁小课堂第42期03-13 CIQTEK
深入断裂“现场”！扫描电镜在金属断口分析中的应用03-13 CIQTEK
热辣滚烫！诺力昂庆祝国际妇女节03-13 Nouryon
干货！补血良药“当归”的农药残留检测03-13 得泰仪器Detelogy
酶标仪怎么选？看这篇就够了03-13 安捷伦科技
精细分型 伴您前行——免疫精细分型11项03-13 安捷伦细胞分析
一个视频带您了解安捷伦Seahorse XF 技术03-13
肿瘤代谢系列讲座 | 肿瘤代谢与免疫专场03-13 安捷伦细胞分析
售后直播间 | Trouble Shooting 之酶标仪与液体处理03-13 安捷伦细胞分析