Flash快速色谱法的纯化理论和选型指导
2022-10-28 18:01:02 艾杰尔-飞诺美（Agela & Phenomenex）
Flash快速色谱法是一种纯化技术，通过增加压力推动溶剂带移动进行快速分离，代替古老的缓慢的低效的重力作用色谱法。与传统玻璃色谱柱技术的不同之处在于使用稍小的硅胶颗粒和50–200 psi的压力。快速色谱柱通常是预装的塑料柱，硅胶粒径在40–60 mm之间。自动快速色谱纯化系统由液相色谱系统中常见的部件组成，例如梯度泵、进样口、UV检测器和收集洗脱液的馏分收集器。
艾杰尔全新自动化纯化色谱系统
40多年前，Clark Still最早报道了快速色谱法，但开发仍处于起步阶段，因为新发现的方法很费力，并且存在玻璃柱破碎的风险。然而，到1994年，一次性塑料小柱减少了制备过程，提高了重现性并缩短了分离时间。
老式玻璃柱
艾杰尔Claricep系列Flash柱
快速色谱法广泛用于分离密切相关的有机化合物。在制药行业，可用于纯化各种多肽、抗生素和相关药物中间体，用于药物发现和开发。它还可用于分离天然产物，如生育酚、生物碱、黄酮和大麻素。
市场规模和增长估计来自TDA的行业数据，这是一个技术市场概况和基准数据库，涵盖实验室和过程分析仪器。
2019年，快速色谱的总市场约为1.5亿美元。在过去十年中，生物制药市场逐渐扩大了其使用范围，占需求的四分之三以上。Flash柱预计将实现稳健增长，并且Flash仪器系统的需求预计将更强劲。用户继续青睐与先进检测器结合使用的Flash仪器，例如蒸发光散射检测器 (ELSD) 。
在Flash纯化产品领域，艾杰尔Claricep系列可提供应用于各种纯化领域的无定形硅胶基质和球形硅胶基质两种类型Flash手拧纯化柱，并运用独特的装填技术在保证柱效的同时也保证了实验重现性。外壳运用聚丙烯，保证对各类溶剂的兼容性，具有耐压高、柱效高、耐腐蚀等特点。
某医药中间体
纯化前分析谱图：
色谱柱：Innoval ODS-2 5μm 100Å 4.6×250mm（PN：IX952505-2）
流动相：A：水（0.05% TFA）
B：乙腈（0.05% TFA）
流速：1mL/min
波长：204nm
Time | B% |
0 | 80 |
20 | 90 |
采用Flash快速纯化富集：
仪器：Cheetah Ⅱ中压制备系统（PN: CH-200PII）
色谱柱：Flash C18 20-35μm 100Å 4g 三支串联
流动相：A：水：乙腈=50:50
B：水：乙腈=20:80
流速：15mL/min
波长：254nm, 280nm
进样量：105 mg
Time | B% |
0 | 0 |
15 | 30 |
16 | 100 |
26 | 100 |
15.6-16.6min馏分检测，满足纯度要求：
某植物油提取物
色谱柱：Luna C8(2) 5μm 100Å 4.6×250mm （PN: 00G-4249-E0）
流动相：A：水 B：甲醇
流速：1mL/min
波长：216nm
柱温：30℃
Time | B% |
0 | 80 |
30 | 100 |
Flash纯化谱图：
仪器：Astra中压制备系统 (PN: AS-204PII)
色谱柱：Flash C18（2）20-35µm 100Å 40g和80g串联
流动相：A：水 B：甲醇
流速：40mL/min
波长：230nm（红色信号线）；216nm（蓝色信号线）
上样量：250mg油样品
Time | B% |
0 | 70 |
70 | 93 |
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