No.227｜刺五加浸膏，峰多且密不好分，MGIII来帮您

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客户提供枸刺五加浸膏供试品、紫丁香苷和刺五加苷E混合对照品，希望按照2020版中国药典一部刺五加浸膏项下含量测定的方法，获得良好分析结果。

因用户反馈已尝试多支色谱柱并难以取得良好的结果，所以我们挑选了不同极性和疏水性的C18色谱柱进行初步尝试，包括高极性低疏水性的CAPCELL PAK C18 AQ、中等极性和疏水性的CAPCELL PAK C18 MGII、低极性高疏水性的SUPERIOREXII ODS色谱柱，得到对比结果如图1-3所示。

从局部放大图中可看到，AQ色谱柱分析结果中紫丁香苷前缺少一个明显杂质峰，从峰面积判断可能该杂质峰与主峰合并。不同色谱柱对刺五加E峰出峰前后杂质影响也较大，可看到MGII、ODSII色谱柱前有小杂质峰与刺五加E峰未能得到基线分离，出峰顺序也不完全一致。由以上对比分析结果可知，对于刺五加浸膏分析，不同物性C18色谱柱获得谱图差异较大。

图1 不同色谱柱对比分析结果

图2 局部放大图 (5-15min) (红色箭头标注为紫丁香苷)

图3 局部放大图(15-30min)(蓝色箭头标注为刺五加苷E)

【色谱条件】

色谱柱：

CAPCELL PAK C18 AQ S5;4.6mm i.d.×250mm

CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6mm i.d.×250mm

SUPERIOREXII ODS S5; 4.6mm i.d.×250mm

流动相：A，乙腈  B，0.1% 磷酸

流   速：1000 µL / min

温   度：30°C

检   测：PDA 220 nm

进样量：10 µL

样   品：对照品：紫丁香苷40 µg/mL、刺五加E 20 µg/mL（甲醇）

            供试品：取本品2 mL，至10 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度

在以上结果基础上，我们综合考虑色谱柱含碳量影响，最终选择了CAPCELL PAK C18 MGIII色谱柱作为分析柱，得到的分析结果如图4-5所示，紫丁香苷理论塔板数28522，能够满足不小于10000要求，同时与前后杂质峰分离度分别为1.97和2.11，符合分离度要求。刺五加苷E与前后杂质峰分离度分别为2.06和1.68，也可以符合基线分离要求。

图4 C18 MGIII分析结果

图5 C18 MGIII分析结果局部放大图（图上所示数字为理论塔板数和分离度）

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 4.6mm i.d.×250mm

流动相：A，乙腈  B，0.1% 磷酸

流   速：1000 µL / min

温   度：30°C

检   测：PDA 220nm

进样量：10 µL

样   品：对照品：紫丁香苷40 µg/mL、刺五加E 20 µg/mL（甲醇）

            供试品：取本品2 mL，至10 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度

综上所述，使用CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 4.6mm i.d.×250mm色谱柱，在2020版中国药典一部刺五加浸膏项下含量测定的方法下，可完成刺五加浸膏的分析，理论塔板数和分离度符合要求。