2022-09-19 20:22:18 华谱科仪(北京)科技有限公司
前言
叶酸是含有碟酰谷氨酸结构的一类化合物统称。食物中的叶酸绝大多数是以喋酰多谷氨酸的形式存在的。目前《GB5009.211-2014》国标中测定叶酸方法为微生物法,此方法操作繁琐,检测周期长。因此,开发出一种高效快速的叶酸测定方法具有重要意义。
接下来,小编将带您来了解一种快速测定食品中叶酸的方法。该方法采用华谱S6000Plus超高效液相色谱仪以及Alphasil VC-C18色谱柱来进行叶酸的测定,可实现快速、高效检测。
分析条件
图1. S6000Plus超高效液相色谱仪
实验结果
① 实际样品测定
检测浓度为20.0 ng/mL的叶酸标准溶液,结果如图2(a)所示,叶酸保留时间为12.54 min,峰形良好且无杂质干扰。
按照前处理步骤分别处理苹果、白菜、黄豆、A品牌奶粉和B品牌奶粉空白样品,得到色谱图如图2(b-f)所示,可以看出,样品中的叶酸色谱峰附近无杂质干扰,前处理净化效果良好。
图2.(a) 20 ng/mL叶酸标准溶液色谱图;(b) 苹果样品中叶酸色谱图;(c) 白菜样品中叶酸色谱图;(d) 黄豆样品中叶酸色谱图;(e) 奶粉A样品中叶酸色谱图;(f) 奶粉B样品中叶酸色谱图
峰1:叶酸
② 检出限和定量限
本方案中,奶粉是所有检测食品中灵敏度最低的,经过前处理富集纯化,上机检出限浓度为0.5 ng/mL,定量限浓度为1.0 ng/mL。经过测定得到检出限信噪比为4.65,定量限信噪比为10.20。本方案检出限和定量限与国标《GB5009.211-2014》的对比如表1所示,检出限和定量限色谱图如图3所示,满足检测要求。
表1. 检出限和定量限
图3.(a)检出限0.5 ng/mL叶酸色谱图;(b) 定量限1.0 ng/mL叶酸色谱图
③ 线性
将叶酸配制成0~500.0 ng/mL浓度范围的标准溶液进行线性考察,以峰面积对浓度做标准曲线(如图4所示),在0~500.0 ng/mL浓度范围内线性良好,线性相关系数R2为0.9997。
图4. 叶酸标准曲线
④ 重复性
在苹果基质添加1.0 µg/mL的叶酸标准品,进行6次重复性实验,保留时间RSD为0.06%,峰面积RSD为0.82%,结果符合标准要求,色谱图如图5所示。
图5. 叶酸重复性色谱图
峰1:叶酸
⑤ 加标回收率
分别以白菜、苹果、奶粉A、奶粉B以及黄豆为基质进行加标回收率考察,每种基质平行三份。测定结果如图6所示,回收率均在75~120%之间,满足国标要求。
图6. 回收率测定结果
结论
采用华谱 S6000Plus 超高效液相色谱仪,搭配 Aphasil VC-C18(3.0 × 150 mm, 2.5 μm, 100Å)色谱柱,可以实现食品中的叶酸快速高效检测。测定方法的重复性、线性以及加标回收率均满足标准要求,检出限为0.5 ng/mL,定量限为1.0 ng/mL。该高效液相色谱法测定食品中叶酸含量具有较高的准确度和精密度,因此本方案满足食品中叶酸的检测要求,并具有广泛的应用前景。
产品信息
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