如何快速高效的检测食品中的叶酸？

图1. S6000Plus超高效液相色谱仪

① 实际样品测定

检测浓度为20.0 ng/mL的叶酸标准溶液，结果如图2(a)所示，叶酸保留时间为12.54 min，峰形良好且无杂质干扰。

按照前处理步骤分别处理苹果、白菜、黄豆、A品牌奶粉和B品牌奶粉空白样品，得到色谱图如图2(b-f)所示，可以看出，样品中的叶酸色谱峰附近无杂质干扰，前处理净化效果良好。

图2.(a) 20 ng/mL叶酸标准溶液色谱图；(b) 苹果样品中叶酸色谱图；(c) 白菜样品中叶酸色谱图；(d) 黄豆样品中叶酸色谱图；(e) 奶粉A样品中叶酸色谱图；(f) 奶粉B样品中叶酸色谱图

峰1：叶酸

② 检出限和定量限

本方案中，奶粉是所有检测食品中灵敏度最低的，经过前处理富集纯化，上机检出限浓度为0.5 ng/mL，定量限浓度为1.0 ng/mL。经过测定得到检出限信噪比为4.65，定量限信噪比为10.20。本方案检出限和定量限与国标《GB5009.211-2014》的对比如表1所示，检出限和定量限色谱图如图3所示，满足检测要求。

表1.  检出限和定量限

图3.(a)检出限0.5 ng/mL叶酸色谱图；(b) 定量限1.0 ng/mL叶酸色谱图

③ 线性

将叶酸配制成0~500.0 ng/mL浓度范围的标准溶液进行线性考察，以峰面积对浓度做标准曲线(如图4所示)，在0~500.0 ng/mL浓度范围内线性良好，线性相关系数R²为0.9997。

图4. 叶酸标准曲线

④ 重复性

在苹果基质添加1.0 µg/mL的叶酸标准品，进行6次重复性实验，保留时间RSD为0.06%，峰面积RSD为0.82%，结果符合标准要求，色谱图如图5所示。

图5.  叶酸重复性色谱图

峰1：叶酸

⑤ 加标回收率

分别以白菜、苹果、奶粉A、奶粉B以及黄豆为基质进行加标回收率考察，每种基质平行三份。测定结果如图6所示，回收率均在75~120%之间，满足国标要求。

图6. 回收率测定结果

结论

采用华谱 S6000Plus 超高效液相色谱仪，搭配 Aphasil VC-C18(3.0 × 150 mm, 2.5 μm, 100Å)色谱柱，可以实现食品中的叶酸快速高效检测。测定方法的重复性、线性以及加标回收率均满足标准要求，检出限为0.5 ng/mL，定量限为1.0 ng/mL。该高效液相色谱法测定食品中叶酸含量具有较高的准确度和精密度，因此本方案满足食品中叶酸的检测要求，并具有广泛的应用前景。

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