色谱小知识：为反相 LC 选择合适的流动相

流动相的一些特性可以帮助我们为反相分析选择正确的流动相组成。这些特性包括：

• 溶剂纯度——在 LC 中选择作为流动相的溶剂应为 色谱纯度或质谱级纯度，应进行过滤和超声处理，以确保 UV 光谱中的吸光度最小且不含气泡。

• 溶剂粘度——反相流动相应为最佳粘度，以帮助确保通过HPLC 柱固定相的最佳线速度，从而提供更窄和更尖锐的峰，因而提高分析的整体灵敏度。

• 折光率——这是使用示差折光检测器时的一个关键考虑因素。理想情况下，当使用示差检测器时，流动相和样品溶剂应具有相似的折射率以避免出现负峰，换句话说，样品应在流动相中制备。

• 溶剂沸点——最好选择沸点低的溶剂以提高回收率，特别是在LC-MS 中，挥发性更强的溶剂将改善离子化，从而提高MS 灵敏度。

• 无腐蚀性——流动相溶剂不得腐蚀流路中的 HPLC 管、泵阀、密封件和其他部件。

• 溶剂毒性——确保溶剂无毒并且应使用稳定状态下的溶剂。

• 溶剂混溶性——选择与样品完全混溶的溶剂。分析物也必须可溶。否则，在色谱柱入口筛板处将产生样品沉淀，从而引发高背压、基线问题、导致分析物峰灵敏度较低以及色谱图中峰面积和峰形问题。

• 流动相透光度——选择一种在检测波长下可以透射的流动相。

• 洗脱强度——这是溶剂从固定相中洗脱目标分析物的能力。洗脱强度越高，溶剂越有效，选择性越好。流动相溶剂应具有最佳和足够的洗脱强度，以实现对目标分析物的选择性。