DBS 助力筛查新生儿 X-连锁肾上腺脑白失养症 （X-ALD）

编码 ALD蛋白质 (ALDP) 的 ABCD1 基因变异会导致一种疾病，即 X-连锁肾上腺脑白失养症 (X-ALD)，这是一种常见的过氧化物酶体病，拥有着较高的发病率，其原理是由于 ALDP 参与极长链脂肪酸 (VLCFA)-CoA 酯穿过过氧化物酶体膜的运输，因此 ALDP 缺乏会导致长链脂肪酸在血浆和组织中的累积。

X-ALD 的患者拥有几种表型，包括从肾上腺皮质功能减退症，即艾迪生病到缓慢进展性肾上腺脊髓神经病 (AMN) 再到急性致命颅内 X-ALD，所以尽早诊断治疗 X-ALD 至关重要。

X-ALD 目前尚无特效治疗，多种方法正在探索中。1. 对于无症状患者，可以通过饮食治疗，但不能改变病程；2. 骨髓移植是目前最有效手段，但价格昂贵，适用于发病早期的儿童型 ALD；3. 造血干细胞治疗同样也取得了一定的效果，但不推荐给无症状患者或者单纯 AMN 患者；4. 基因治疗最有前途，但尚未开展临床实验，很多技术与伦理问题有待进一步讨论。

不过，传统的确诊方法一直缺乏着效率。对临床表现和磁共振成像 (MRI) 异常的疑似X-ALD 患者，应用气相色谱法检查血浆、红细胞和培养的皮肤成纤维细胞中 VLCFA 的异常升高，来加以确定。

这也就产生了问题，因为 X-ALD 的表型变异，通常会导致误诊和延迟诊断的发生。不过随着高通量 X-ALD 筛查技术的发展，现在，患者们甚至可以刚出生就进行确诊并在早期阶段进行治疗。

由于在患者体内累积的极长链脂肪酸当中，有 26：0 溶血卵磷脂 (26:0 LysoPC) 是一种敏感生物标志物，可用于新生儿 X-ALD 筛查，但在世界范围内还没有具体应用，因此研究评估了三种溶血卵磷脂 (20:0 LysoPC, 24:0 LysoPC和26:0 LysoPC) 在新生儿X-ALD筛查中的可行性。

实验所采取的研究对象为 604 名新生儿，与 50 名健康成年人 (样本数 50) 和 4 名X-ALD 患者。我们将他们的血液保存在卡片上，然后对干血点 (DBS) 进行打孔萃取，用高效液相色谱-串联质谱 (HPLC-MS/MS) 定量分析其中各种溶血卵磷脂 (LysoPC) 含量。

结果表明，串联质谱 (MS/MS) 在混合标准物与干血点中的测量结果可信 (同日与日间的变异系数均 <15.9%）。同时 26:0 LysoPC 在 X-ALD 诊断中要优于 20:0 LysoPC 与 24:0 LysoPC，因为后两者测得的患者与健康样本的含量有重叠 (图1，2，3），故而不能作为判断依据。

而 26:0 LysoPC 含量则可以显著区分患者与健康的样本，每片干血片 (直径 3mm)上，患者的 26:0 LysoPC 含量在 2.0 - 4.0pmol 之间，新生儿和健康成人则在 0.1 - 1.9pmol 之间。在此基础上，26:0 LysoPC 含量在 1.7pmol 以上仍需要进一步确诊 （可信区间 <5%）。

所以运用干血点法收集样本，既节省了时间，也把控了成本，又益于样本运输，实现快速高通量分析，具有极高的临床应用价值。