阿拉丁细胞裂解液选型与配制

2020-12-25 11:27:06 上海阿拉丁生化科技股份有限公司


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细胞裂解液是以去污剂为基础、针对细胞裂解应用、成分优化的缓冲液和试剂。对于不同细胞类型、蛋白定位、以及下游应用,需要不同的细胞裂解液进行有效的细胞裂解和蛋白提取。
根据去污剂类型、蛋白定位、及目的蛋白性质来确定细胞裂解液的种类。


去污剂主要类型及其作用


根据蛋白定位不同推荐的裂解液种类


常用细胞裂解液


RIPA缓冲液

简介

最初以其开发的测定方法(放射免疫沉淀测定法)来命名,是两种离子去污剂和一种非离子去污剂的Tris缓冲液,也是哺乳动物细胞或软组织裂解和蛋白提取的常用选择。

常用配方

25 mM Tris-HCl, pH 7.6

150 mM NaCl

1% NP-40

1%去氧胆酸钠

0.1%十二烷基硫酸钠(SDS)

兼容应用

BCA及去污剂兼容型的Bradford试剂蛋白浓度测定、SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹、ELISA及纯化等。


IP缓冲液

简介

是一种修饰型的RIPA缓冲液(不含SDS),可有效溶解细胞蛋白,但无法释放基因组DNA或破坏蛋白复合物,可兼容下游的免疫沉淀或者亲和吸附的应用。

常用配方

25 mM Tris-HCl, pH 7.4

150 mM NaCl

1% NP-40

1% mM EDTA

5% 甘油

兼容应用
BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀及报告基因检测。


NP-40缓冲液

简介

NP-40是一种非离子型聚氧乙烯表面活性剂,常作为细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液的组分。

常用配方

150mM NaCl

1.0% NP-40

50mM Tris-HCl,pH值8.0

兼容应用

BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。


Tris-Triton缓冲液

简介

非离子型表面活性剂,常用作细胞裂解缓冲液或其他用于提取和溶解蛋白质的溶液。Trition X-100效果介于NP-40和SDS之间。

常用配方

10mM 三羟甲基氨基甲烷(Tris),pH值7.4

100mM NaCl

1mM EDTA

1mM EGTA

1% Triton X-100

10% 甘油

0.1% SDS

0.5% 去氧胆酸钠

兼容应用

BCA及去污剂兼容型Bradford试剂蛋白浓度测定、蛋白质免疫印迹、ELISA、免疫沉淀。


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