2020-09-19 07:11:21, 质谱成像先锋队 布鲁克(北京)科技有限公司-质谱仪器
基质辅助激光解吸电离(MALDI)成像是DMPK研究的有力工具,它提供了药物和代谢物的特异性测量,用于早期药物筛选。timsTOF fleX是布鲁克新型的MALDI成像质谱系统,凭借ESI/MALDI双重离子源和把高灵敏的LC-MS/MS PASEF测量与高分辨率MALDI成像相结合,完成从目标分子成像到非目标SpatialOMx研究。最新一代的timsTOF fleX使用创新的激光后电离MALDI-2技术获得了较传统MALDI 高1-3个数量级的灵敏度【1-2】。MALDI-2提高了离子产率并降低了离子抑制效应。同时,MALDI-2还可对传统MALDI不能电离的药物和代谢物分子检测和成像,如甾醇、他汀类、激素、维生素、聚糖等生物分子。这种实质性的改进对于DMPK研究尤其重要。
本应用报告测试了MALDI-2对添加BI-YYY药物标样组织切片灵敏度的增强,并在大鼠用氯喹或BI-YYY给药后,用MALDI-2成像分析,以确定灵敏度提高是否转变为重要的药物定位信息。此外,还研究了氯喹代谢物分布,测试MALDI-2在检出限上的提高。
样品制备与实验条件
实验使用大鼠新鲜肝脏和肾脏组织冷冻切片,切片安放在布鲁克IntelliSlide™自定位玻片上。在切片表面点加咖啡因、氯喹、瑞舒伐他汀、BI-YYY和利血平混合物,施加2,5-二羟苯乙酮(DHAP)基质,在1-100µM浓度范围内测试MALDI-2的灵敏度增加。随后,大鼠在分别给予氯喹或 BI-YYY药物2小时或24小时后取组织样本,在配置了MALDI-2的timsTOF fleX质谱系统上采集切片的质谱数据,像素尺寸为50µm。用SCiLS Lab软件处理得到组织切片分子图像,然后用MetaboScape® 2021软件中的BioTransformer模块预测了35个代谢产物[3],对其中19个特别代谢物做了鉴定和强度测量,并计算了相对含量。
结果与讨论
标准小分子药物被用来考察BI-YYY药物电离效率的增加。比较系列浓度咖啡因、氯喹、瑞舒伐他汀、利血平和BI-YYY混合物的对照肝组织的MALDI和MALDI-2分子图像(见图1),MALDI-2显著提高了所有五种受试化合物的灵敏度,其中新的药物BI-YYY的峰值强度使用MALDI-2提高了300倍。
图1: 对照和氯喹或BI-YYY给药大鼠,用MALDI和MALDI-2的SCiLS Lab成像结果比较。不同颜色表示强度梯度变化,黄色比蓝色有更高的强度。
图2:氯喹的代谢物,用MALDI和MALDI-2用SCiLS Lab成像结果比较。不同颜色表示强度梯度变化,黄色比蓝色有更高的强度。
参考文献
▼▼点击“阅读原文”,了解详情
09-18 宣讲团
全球科学与生命健康论坛举行 目前我国已有11款新冠疫苗进入临床试验阶段09-18 宣讲团
16个立项!科技部2020年度重点专项定向项目安排公示09-18 请关注>>
医学部评审也结束了,为何还不放榜呢?09-18 解说号整理
部分高校公布2020年国家自然科学基金立项数据09-18 请关注>>
招收博士生!奖学金每月2万元!09-18 转自生信技能树
这本中科院1区的SCI,对Figure的色彩要求值得学习09-18 Figure图助手
SCI发表之绿色快速通道:这本接近5分的SCI,最快可一周内接受09-18 请关注>>
各种化学试剂的开瓶后的有效期09-18 欢迎关注 →
河南五家第三方检测公司被暂停认可监测数据报告!09-18 小帮
“箍牙”不只是为了美!原来真正的目的是「调整咬合」09-18 生命时报微信
吸血鬼老家的科研动态?原来1H NMR可以分析南瓜籽的营养成分!09-18 Bruker
Bruker BioSpin 产品维护及售后服务提示09-18 Bruker
金秋九月|布鲁克花开三地,期待与您线下相约09-18 Bruker
医药板块大幅回调,未来上涨机会在哪?09-18 阿多
API China第85届中国国际制药设备展观众预登记已开启09-18
亿元级大品种药品市场将迎大洗牌09-18 阿多
中药产业危机来了,超七成企业业绩大降!09-18 阿木
宁波市生态环保产业集团成立 专注于固废垃圾处理利用09-18
100亿!启迪环境拟与西安碑林区政府合作设立启迪零碳能源集团09-18