采用HILIC色谱柱TSKgel Amide-80测定甜菜碱的含量

2020-08-19 19:34:49 东曹(上海)生物科技有限公司


甜菜碱(Betaine)是一种生物碱,天然存在于很多动植物体内。其分子内有3个有效甲基,作为甲基提供者参与合成蛋氨酸,在营养物质的代谢中起着十分重要的作用。甜菜碱在医药、化妆品、食品发酵和饲料工业等多个行业中都有广泛的应用。

本应用参照行业标准NY/T 2947-2016,按高效液相色谱法,采用亲水作用多孔硅胶色谱柱TSKgel Amide-80 (3 μm, 4.6 mm I.D. × 15 cm) 来测定甜菜碱的含量。分析结果表明,该色谱柱完全满足标准中对甜菜碱分离检测的要求。

溶液配制

样品稀释液:75% 乙腈-水溶液。

用样品稀释液将甜菜碱储备液 (2 mg/mL) 序列稀释得到浓度为0 μg/mL,20 μg/mL,50 μg/mL,100 μg/mL,200 μg/mL,500 μg/mL,1000 μg/mL,2000 μg/mL的标准工作液,依次由低到高进样检测。

分析条件

色谱柱:TSKgel Amide-80 (3μm, 4.6mmI.D. ×15cm)

流动相:乙腈-水,梯度洗脱

流速:1.0 mL/min

柱温:30℃

紫外检测器:205 nm

进样量:10 μL

流动相梯度洗脱程序见下表:

时间 (min)

水 (%)

乙腈 (%)

059521090330704~9505010~15595

分析结果

图1.  甜菜碱2000 μg/mL检测图谱

图2.  甜菜碱标准曲线(标准方差=0.99997)

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