2020-06-28 22:51:47 东曹(上海)生物科技有限公司
尺寸排阻色谱 (SEC) 是生物制药质量控制中用于分析mAb聚集体 (HMW) 和片段 (LMW) 的标准方法。一直以来,人们都是使用25 nm孔径的硅胶基质固定相来分析常规单克隆抗体。但是,对于一些新型抗体,例如双特异性T细胞抗体、抗体细胞因子融合蛋白等,分子量要远高于常规抗体,因此需要稍大孔径的色谱柱才能精确分析其中的高分子杂质。
TSKgel UP-SW Aggregate是UP-SW系列硅胶基质SEC色谱柱中的最新产品,其孔径为30 nm,专为分析超大分子蛋白质和高阶抗体聚集体而设计。
本应用展示了UP-SW Aggregate色谱柱在测定大分子免疫球蛋白IgM的HMW杂质以及常规mAb的高阶聚集体时优异的分离性能。
01
mAb二聚体及聚集体的分析
我们比较了UP-SW系列的两款色谱柱,UP-SW3000 (与著名的G3000SWXL色谱柱具有相同孔径) 和UP-SW Aggregate (孔径更大) 对单克隆抗体HMW和LMW杂质的分离情况,发现UP-SW3000可以很好地分离HMW和LMW杂质,而UP-SW Aggregate则可以更精确地观察高阶聚集体的分布情况。
02
人血清中IgM单体和聚集体的分离
图2是使用UP-SW3000和UP-SW Aggregate色谱柱分析人免疫球蛋白IgM的谱图。IgM的分子量远高于IgG,因此UP-SW3000无法分离IgM的单体和多聚体,而UP-SW Aggregate可以确定IgM聚集体的含量。
03
mAb热聚集的分析
图3是使用UP-SW Aggregate色谱柱分析热变性mAb的结果。先用20 mmol/L磷酸钠缓冲溶液,pH 7.2+150 mmol/L氯化钠将mAb样品稀释10倍,然后等分分装。随后将各等分样品分别在70℃、73℃、77℃以及80℃下保存2小时,使形成mAb聚集体。随着温度的升高,高阶聚集体的含量也会随之增加。在70~80℃之间,可以清楚地分辨出四个不同温度点下聚集体峰曲线的变化。
总结:
TSKgel UP-SW Aggregate是UP-SW系列SEC色谱柱中孔径最大的一款色谱柱,是分析分子量高于标准IgG的生物分子以及高阶聚集体的理想选择。
TSKgel色谱柱参考2015中国药典测定甘草苷含量新冠病毒关联药物和疫苗研发中东曹色谱产品的应用采用G5000PWXL色谱柱分离重组SARS-CoV-2S蛋白用户评价︱让抗体糖链分析变得更简便、高效无需方法转换,常规HPLC色谱柱也能实现UHPLC分离性能
05-28
聚力真空技术,赋能行业发展——2024科学仪器开发者大会“真空技术论坛暨中科科仪地区用户会”融合创新举办05-28
从Microtrac到Microtrac MRB,再到Microtrac的创新与守成——访麦奇克全球销售总监05-27 大昌华嘉
碳酸钙的电声特性05-27 大昌华嘉
邀请函 | 2024中国涂料油墨峰会暨展览会05-27 大昌华嘉
DWS微流变学用于化妆品配方设计—Rheolab应用05-27 大昌华嘉
土壤/植物样品中碳、氮含量以及TOC总有机碳含量测定05-27 大昌华嘉
网络研讨会 | 欢迎来到百欧林(Biolin)用户日2024!05-27 大昌华嘉
网络研讨会 | Turbiscan稳定性分析仪如何改善现代食品和饮料以满足未来需求05-27 大昌华嘉
安捷伦与香港浸会大学合作成立联合实验室05-27
群英荟萃 Park葳蕤: Park 出席半导体先进技术大会展示Park原子力显微镜在化合物半导体应用05-27 Park原子力显微镜
ProteoSil生物用液相色谱柱重磅上市!—解决易吸附金属配位物的拖尾问题05-27 技尔GL Sciences
又一标准发布并实施!天隆参与!05-27
罕与光™公益项目持续扩大受益面,为更多罕见病家庭点亮希望之光05-27
官宣!连华科技新官网正式上线,体验再升级05-24
实战演练,技能精进——连华科技助力郑州市生态环境执法大队技能培训05-24
5月18-28日,快检系列双重优惠火热进行中!05-24
质粒纯化解决方案:五种方案灵活变通,毫厘层析“好帮手”带来质稳高效多样选择,总有一款适合您!05-24
【海能实验室】膳食纤维测定仪测定可溶性、不可溶性及总膳食纤维含量05-24
陕西、北京、天津、湖北……渠道商交流会再更新!05-24