STELLARIS-星耀未“徕”，探索高潜力

上一期介绍了Leica的科学家们利用新一代Power HyD S检测器与全新白激光，挣脱金字塔的束缚。然而，仅在这四个顶点上的不断探索，似乎并不能完全复刻真实。于是科学家们提出了一个新的方向——功能成像。

为了实现功能成像，我们在之前的成像基础上引入一个崭新的维度——荧光寿命成像。

以往，提到荧光寿命成像，对于生物学家来说可谓是爱悠悠恨悠悠，爱它能提供更多维度信息，恨他操作困难。不仅需要采购一整套FLIM相关设备，还要系统学习FLIM的理论知识和专业FLIM软件模块的算法。

经过多年的不断迭代，2018年，Leica推出了高度集成的高速荧光寿命成像FALCON(FAst Lifetime CONtrast)（产品链接）。为了将功能成像带给更多的用户，我们在STELLARIS平台搭载了基于荧光寿命的TauSense模块，使得您更易获得荧光分子的荧光寿命相关信息。毕竟，无论实验样品的制备流程如何，荧光寿命的信息一直存在。结合荧光光谱强度信息，可以同步获得更精准的结构信息和功能信息。

首选，我们来看一下TauSense给大家带来怎样的荧光寿命信息。

（图一）中可以看到，荧光分子的光谱信息和荧光寿命是相互独立的。这就意味着，即使荧光光谱相似，荧光分子也有可能不一样。因此可以通过荧光寿命的不同来区分荧光光谱相近的荧光分子。

图一 荧光光谱和荧光寿命

基于此特性，就有可能将原本荧光光谱叠加的荧光分子区分开来（图二）。原本通过光谱特性区分出的两通道荧光信息，借助荧光寿命的差异，就进一步拆分出了四个独立通道。

图二 利用荧光寿命拆分荧光通道

除此之外，由于荧光寿命并不会受荧光强度和光淬灭的影响，因此利用荧光寿命来进行长时间的功能成像结果更准确。比如进行钙震荡成像时，主要观察钙离子浓度升高和降低的趋势，从图三可以看出恢复静息状态之后，钙离子的荧光寿命与刚开始比较，几乎没有变化。

图三 细胞受到机械刺激后钙震荡过程