显微课堂 | 线虫研究指南-针对线虫的相关工作

“拣虫”：用金属挑针从琼脂平板上挑出虫子，转移到新的平板上进行培养或实验。

通过向线虫体内显微注射核酸进行转基因（基因改造）。

荧光筛选，鉴定表达转染荧光蛋白的转基因线虫。

在实验过程中对线虫（从胚胎到成虫的所有阶段）进行成像和记录。

对比度不够好时，难以识别线虫的关键解剖细节。

长时间拣虫会造成用户疲劳。

用工具处理线虫时，显微镜物镜下没有足够的空间。

视野不够大时，找虫子很麻烦。

配备各种对比方法的透射光底座可实现高光学对比度，从而观察到虫体细节。

采用人体工程学模块，用户安装舒适，减少劳累和疲劳。

物镜下方空间充足，工作距离可达122毫米。

视野更大，更容易发现线虫。

对比度不足，无法观察到线虫的精细解剖细节，而这正是进行适当靶向定位所必需的。

没有足够的空间使用微型注射器。

设置不稳定时振动太大。

光学对比方法，如DIC（微分干涉对比）或IMC（集成调制对比），可清楚地看到注入线虫的位置。

抗震装置（防震装置）稳定可靠。

能够使用精确的操作器（Narishige或Eppendorf）进行微量注射。

荧光信号暗淡，难以观察荧光转基因。

老线虫虫和琼脂发出强烈的自发荧光。

由于视野较小，难以发现线虫，导致筛查时间延长。

采用三光束技术的独立激发通道提高了信噪比，适用于体视显微镜。

使用专门设计的反射镜防止自发荧光，反射镜可与Leica透射光底座一起使用。

徕卡透射光底座提供大视场和多种对比方法。

由于光散射的原因，在对线虫更深处的结构成像时会出现焦外模糊的现象。

避免光和热对线虫造成伤害。

利用基因编码报告器观察活体线虫的暗淡荧光（包括延时成像）。

利用图像增强功能，将线虫深处的细节可视化。

使用高质量的光学元件、适当的照明光源和灵敏的相机/探测器，减少光照射，降低对线虫的伤害。

利用宽场显微镜和高灵敏度显微摄像机的良好单噪比，促进实时成像。

必要时，使用转盘、共聚焦或光片显微镜获取更高分辨率的三维图像。