2020-04-24 10:36:48 SCIEX
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中医药是我国医学科学的特色,也是中华民族优秀文化的重要组成部分,几千年来为中华民族的繁衍昌盛做出了不可磨灭的贡献。随着疾病谱的变化,老龄化社会的到来和健康观念的转变,中医药学的优势越来越显现出来。中药以其安全、副作用小等优点被大家广泛用于预防、治疗、诊断疾病。但由于种类繁多、药效成分复杂等特点限制了很多研究方向的顺利开展。如何完成中药代谢产物分析成为很多科研工作者面临的难题,本文为大家提供一种快速、准确的方法将此类问题一网打尽。
本文采用的方法是基于 SCIEX QTRAP® 系统特有的“杆-阱扫描” (pMRM-IDA-EPI) 流程,以 pMRM(predictive MRM)模式作为预扫描方式去发现全面的代谢产物,通过自动化的数据依赖型采集模式 (Information Dependent Acquisition,IDA) 筛选功能并结合优异的增强子离子扫描(Enhance Product Ion, EPI)模式获得高质量的二级图谱,并结合专业的代谢产物鉴定 LightSight® 软件快速、准确获得鉴定结果,解决此类难题。下面我们以“中草药墨旱莲在大鼠血浆中代谢产物鉴定”为例为大家展开介绍此方法的特点和优势所在。
实验思路
根据成分鉴定结果墨旱莲主要药效成分为三萜类、黄酮类和香豆素类,挑选每一类共有结构作为其母核并结合代谢通路建立全面的 pMRM 方法,智能化的 IDA 流程获得代谢产物 EPI 图谱,应用 LightSight® 软件处理、提取和比对功能快速、准确完成鉴定工作。
图1[1]:墨旱莲成分分析、代谢产物鉴定和整个验证实验流程图
方法优势
pMRM-IDA-EPI之所以作为体内代谢产物鉴定的首选方法,有其独特的优势:
1.LightSight® 软件可自动生成覆盖全面代谢通路的 pMRM 列表,提高效率同时可消除无代谢知识背景的困扰;
2.高质量 EPI 图谱能够解决低含量代谢产物二级图谱质量差的问题,从而保证鉴定结果准确性;
3.智能化的 IDA 模式将两者结合在一起,从高灵敏度发现到获取高质量二级信息自动完成,节约时间成本。
图2和图3为此方法原理示意图:
图2[1]:pMRM-IDA-EPI原理示意图
图3[1]:EPI与MS2模式下二级图谱信号对比图
结果展示
应用先进的 pMRM-IDA-EPI 模式并结合 LightSight® 软件快速、准确鉴定墨旱莲在大鼠血浆中代谢产物近200种:香豆素类26种,三萜类21种,黄酮类152种,进一步体现了此方法的优异性,详细结果展示如图4-6。
图4[1]:大鼠血浆中香豆素类成分主要代谢途径(口服墨旱莲提取物)
图5[1]:大鼠血浆中香豆素类成分代谢产物列表(口服墨旱莲提取物)
图6[1]:大鼠血浆中三萜类成分代谢产物列表(口服墨旱莲提取物)
结果与讨论
应用 SCIEX QTRAP® 系统并结合 LightSight® 软件解决了中药代谢产物鉴定的难题,并通过多种验证方式保证鉴定结果的准确性。此方法可广泛应用于中药提取物、中成药和复方制剂等多种类型中药。同时可应用 IDA 不同结合模式完成中药成分分析等工作,为中药的研究工作保驾护航!
参考文献:
[1] Journal of Chromatography B 1109 (2019) 99-111
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