色谱那些事（第十五期）：死体积与滞留（延迟）体积

本期内容将为您介绍：死体积与滞留（延迟）体积

死体积定义

死体积狭义上指色谱柱中未被固定相占据的空隙体积，即色谱柱内流动相的体积。其实广义上的死体积是指进样位置（进样口）到检测位置（检测器流通池）这一段的体积（PS:除去色谱柱中填料体积），一旦色谱柱连接，这段体积（图示红色管路）是不变的（死的）。

注意事项

• 死体积越大，样品扩散的空间很大，色谱峰会更容易展宽，峰形变差。在我们使用或维护的过程中，如果涉及管路等配件的更换，应该选择与原规格一致的配件，以确保死体积等与原来一致，避免死体积的增加而带来峰形的展宽。

• 接装色谱柱时，需确保管线接头匹配完好（特别注意peek管接头的使用，以及管线与色谱柱的连接处）避免形成接头空腔（如下图）。

滞留（延迟）体积

滞留（延迟）体积一般指从混合器到色谱柱入口之间的体积（下图绿色管线部分）。混合器一般为四元低压泵的比例阀和二元高压的混合器，位于泵模块。滞留（延迟）体积越小，更改流动相比例后，可以快速应用到色谱柱上，从而影响色谱柱中流动相比例的变化。

注意事项

• 等度模式：由于流动相比例无变化，所以滞留（延迟）体积对分离度没有影响。

• 梯度模式：滞留（延迟）体积的大小会直接影响梯度的变化，从而影响到出峰时间和分离度。

• 梯度模式时，无论是滞留（延迟）体积发生了变化（使用不同品牌仪器，或更换与原来不一致的管线），还是更换了不同规格的色谱柱，即使相同的方法设置，如果想要获得与原来一致的分离效果，还需要对方法进行优化。

往期回顾：

第十四期：进样六通阀的使用及保养

第十三期：系统漏液故障的解决（下）

第十二期：系统漏液故障的解决（上）

第十一期：有效预防泵故障

第十期：液相系统压力异常（2）

第九期：液相系统压力异常（1）

第八期：有效延长色谱柱的寿命（下）

第七期：糖分析常用色谱柱

第六期：糖系统检测器-ELSD & RID

第五期：有效延长色谱柱的寿命

第四期：色谱柱的压力限制

第三期：氨基柱的使用

第二期：色谱柱对液相系统的要求

第一期：硅胶基质和聚合物基质色谱柱的保存