夏季饮水，喝进多少微生物？

夏日炎炎，人体对水分的需求增大，饮水量增加，夏季又是微生物污染水体问题频发的季节，如何检测饮用水中微生物污染情况，需要通过检测水中氨氮值来评测。

水中的氨氮主要是微生物分解有机物的产物,其含量高低直接体现水体污染的程度。本方法参考 GB/T 5750.5-2006《生活饮用水标准检验方法 无机非金属指标》，采用水杨酸盐分光光度法对生活饮用水及其水源水中氨氮进行测定，本法最低检测质量为0.25μg。

1、方法原理    

在亚硝基铁氰化钠存在下，氨氮在碱性溶液中与水杨酸-次氯酸盐生成蓝色的化合物，其色度与氨氮含量成正比。

2、主要仪器设备和试剂

a、L6分光光度计（上海仪电分析仪器有限公司）

b、10mL具塞比色管

c、亚硝基铁氰化钠溶液（10g/L）:称取1g，溶于少量水，稀释定容至100mL。

d、 氢氧化钠溶液(280g/L)：称取140g NaOH溶于550 mL水中，煮沸并蒸发至约450mL。冷却后用水稀释至500 mL。

e、柠檬酸钠溶液（400g/L）：称取200g柠檬酸钠溶于600 mL水中，煮沸并蒸发至约450mL。冷却后用水稀释至500 mL。

f、含氯缓冲液：称取12g无水碳酸钠加0.8g碳酸氢钠溶于100 mL水中，加入34ml次氯酸钠（30g/L）并加水至200mL。放置1小时后可使用。

g、水杨酸-柠檬酸盐溶液：称取3.5g水杨酸加入5 mL氢氧化钠，水杨酸溶解后，加1.5 mL亚硝基铁氰化钠和25mL柠檬酸钠溶液摇匀，临用时配制。

h、氨氮标准液：将NH4Cl在105℃烘烤1小时，冷却后称取3.819g溶于纯水稀释至1000ml。

i、氨氮使用液：取5 mL氨氮标准液用纯水定容至1000 ml

3、实验方法

3.1样品预处理

如样品需经过蒸馏处理时，用50ml硫酸（0.02mol/L）作为吸收液

3.2试剂空白的制备：

吸取0.4mL含氯缓冲液加到10mL纯水中，混匀，静止半小时后加1 mL水杨酸-柠檬酸盐溶液。

3.3标准系列的制备：

吸取氨氮的标准工作液0、0.05、0.1、0.5、1.0、1.0、2.0和4.0mL于8支10mL具塞比色管中。加水至10mL刻度，向水样管及标准管中各加1ml水杨酸-柠檬酸盐溶液，立即加入0.4 mL含氯缓冲溶液，充分混匀，静止90min后测定，颜色可稳定24h。

3.4计算

标样及样品均在655nm波长下，用1cm比色皿，以纯水为参比，测定吸光度

水样中氨氮质量浓度计算 

ρ（NH3-N）= 

式中（NH3-N）—水样中氨氮质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）

m—从标准曲线上查得样品管中氨氮质量，单位为微克(μg)

V—水样体积，单位为毫升（mL）

4、标准溶液工作曲线建立

标准溶液的浓度与吸光度数值见下表，依此数据建立工作曲线见下图：

浓度   0 0．025 0．05 0．25 0．5          0．75 1．0         2．0

吸光度0 0．001 0．079 0．186 0．392 0．608 0．795 1．577