牛血清中的氯丙嗪如何测定?

2019-02-13 16:55:25 北京莱伯泰科仪器股份有限公司



莱伯泰科
氯丙嗪属于二甲胺族吩噻嗪类药物,为抗精神病药的代表药。那么怎样才能真实有效、快速地检测血液中的该物质呢?这正是这篇文章想告诉您的。
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实验目的

使用PrepElite-GVS全自动凝胶净化定量浓缩固相萃取系统,对牛血清中氯丙嗪进行回收率测定。

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实验过程
2.1  仪器与试剂
固相萃取仪:PrepElite-GVS,莱伯泰科美国公司;
高效液相色谱仪:LC600 二元高压梯度高效液相色谱,北京莱伯泰科仪器股份有限公司;
固相萃取柱:LabTech HLB150mg/6mL;
氯丙嗪标准工作液:100μg/mL ;
乙腈(色谱纯,Fischer 公司);
甲醇(色谱纯,Fischer 公司);
二氯甲烷(AR. 北京化学试剂厂重蒸后使用);
蒸馏水;
磷酸二氢钠(一水)(山东西亚化学工业有限公司);
磷酸氢二钠(无水)(天津市化学试剂六厂);
乙酸铵(AR. 北京化学试剂厂);
牛血清:上海科鉴生物科技有限公司;
磷酸盐缓冲液(pH=6): 12.1g 磷酸二氢钠和 1.75g 磷酸氢二钠溶于 1L 水中;
洗脱液:甲醇:二氯甲烷=1:4;
流动相:乙腈-醋酸铵缓冲溶液(取乙酸铵3.85g加水1000mL溶解)= 65:35。
2.2 全自动固相萃取过程
2.2.1  加标样品预处理
取牛血清1mL加人磷酸盐缓冲液3mL平衡,加标10μL。
2.2.2  固相萃取浓缩过程
将加标样品置于PrepElite-GVS的样品架上,按照图1的固相萃取方法进行血液中氯丙嗪的萃取净化。洗脱液在40℃下氮吹浓缩近干后,用流动相定容至1m。
2.3  HPLC-UV分析
色谱柱:Promosil C18,5μm,4.6*150mm;
波长:254nm;
流速:1mL/min;
柱温:35℃;
进样量:20μL;
流动相:乙腈-醋酸铵缓冲溶液= 65:35
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加标回收率结果
3.1  氯丙嗪标样色谱图

图3为氯丙嗪标样的色谱图。

3.2  加标样品色谱图

图4为加标样品的色谱图,得到的加标回收率及平行性结果详见3.3。

3.3 加标回收率结果

通过计算得到该方法中氯丙嗪的加标回收率及平行性结果(见表1)。氯丙嗪的加标回收率为83.61~89.17%,平行性RSD 为3.4%。

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结果与讨论

本方法用PrepElite-GVS全自动凝胶净化定量浓缩固相萃取系统,对血液中氯丙嗪进行萃取净化,其加标回收率83.61~89.17%,平行性RSD 3.4%。说明PrepElite-GVS全自动凝胶净化定量浓缩固相萃取系统完全符合该方法的应用要求,并且在回收率和平行性上表现优异。



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