2026-06-29 17:01:59, 美谷分子仪器 美谷分子仪器(上海)有限公司
在分子生物学实验中,质粒 DNA 的制备与定量是基因克隆、PCR、转染及测序等核心步骤的基础。传统方法常依赖于大体积的摇瓶培养,步骤繁琐、耗时且试剂消耗量大。如何实现小体积、高效率、高灵敏度的质粒制备与定量,是提升实验室通量与重现性的关键。
通常,质粒提取需要至少几毫升的过夜菌液。而利用 96 孔微孔板进行小体积(如 200 μL)细菌培养,不仅能大幅节约培养基和抗生素,更便于进行高通量筛选与平行实验。但随之而来的挑战是:微量培养后的菌体量少,提取的质粒 DNA 浓度低,如何实现准确定量?
Molecular Devices 推出的高效工作流,结合 SpectraMax iD3s 多功能微孔板读板机与 Quant-iT™ PicoGreen™ dsDNA 高灵敏度荧光检测,完美应对这一挑战:
使用 iD3s 的振摇与温控功能,在 37 ℃ 下对 96 孔板中的大肠杆菌进行长达 18 小时的连续监测,每 15 分钟读取一次吸光度,精准掌握生长曲线,确保培养一致性。
培养结束后,直接使用磁珠法质粒提取试剂盒(如 Mag-Bind® Ultra-Pure Plasmid DNA 96 Kit)进行纯化,适配 96 孔深孔板,轻松实现高通量、自动化操作。
提取的质粒 DNA 通常浓度较低。PicoGreen 荧光染料对双链 DNA 具有极高亲和力,检测灵敏度可达 50 pg/mL,动态范围跨越四个数量级,即使微量样本也能获得准确浓度。
内置 Protocol,一键运行:SoftMax Pro 软件内置 PicoGreen 检测方案,包含优化的激发/发射波长(490 nm/530 nm)、PMT 增益与读板高度,确保数据准确可靠。
软件可自动生成标准曲线(R² 常大于 0.998),并根据样本荧光值直接计算浓度,同时显示重复孔的标准偏差与变异系数,数据可信度一目了然。
该方法同样适用于具备荧光检测功能的 SpectraMax iD5e 等机型,为不同通量需求的实验室提供一致的高质量数据。
实验数据显示,从微孔板小体积培养中提取的 20 个质粒样本,浓度在 134.8 ng/mL 至 993.8 ng/mL 之间,全部落在标准曲线范围内,证明该方法稳定且覆盖范围广。
传统“摇瓶+分光光度计”的模式正在被更集成、更智能的微孔板解决方案所替代。通过 SpectraMax iD3s 微孔板读板机实现从细菌生长监测到 DNA 荧光定量的全程一体化操作,不仅节省样品与试剂,更通过自动化与高灵敏度检测,显著提升实验效率与数据可靠性。质粒提取,本可以更简单。
SpectraMax iD3s 多功能微孔板读板机
关于美谷分子仪器
Molecular Devices 始创于上世纪 80 年代美国硅谷,并在全球设有多个代表处和子公司。2005 年,Molecular Devices 在上海设立了中国代表处,2010 年加入全球科学与技术的创新者丹纳赫集团,2011 年正式成立商务公司:美谷分子仪器 (上海) 有限公司。Molecular Devices 以持续创新、快速高效、高性能的产品及完善的售后服务著称业内,我们一直致力于为客户提供在生命科学研究、制药及生物治疗开发等领域蛋白和细胞生物学的创新性生物分析解决方案。
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