新品上市 | BeaverBeads®小鼠Pan B细胞分选试剂盒

用BeaverBeads^®小鼠Pan B细胞分选试剂盒（阴选）从C57BL/6小鼠的骨髓细胞和脾细胞中分选总B细胞。分选前后的细胞用FITC anti-mouse CD3抗体（克隆号145-2C11）和APC anti-mouse CD19抗体（克隆号6D5）染色后进行流式细胞分析。如图1所示，脾细胞分选前后B细胞纯度分别为63.8%和98.8%；骨髓细胞分选前后B细胞纯度分别为28.2%和91.1%。

图1. 流式检测分选前后B细胞纯度

分选后CD19⁺ B细胞纯度的分析：用BeaverBeads^® 小鼠Pan B细胞分选试剂盒（阴选）从C57BL/6健康小鼠的腹腔灌洗液中分选总B细胞，分选前后的细胞用FITC anti- mouse CD3抗体（克隆号145-2C11）、PE anti-mouse CD11b（克隆号M1/70）和APC anti-mouse CD19抗体（克隆号6D5）染色后进行流式细胞分析。如图2所示，腹腔灌洗液分选前后B细胞纯度分别为30.9%和97.1%，且分选后的CD19⁺细胞中保留了CD11b^dim细胞群。

图2. 流式检测腹腔灌洗液分选前后B细胞纯度

分选后B1 B细胞的保留和鉴定：用BeaverBeads^® 小鼠Pan B细胞分选试剂盒（阴选）从C57BL/6健康小鼠的腹腔灌洗液中分选总B细胞，分选前后的细胞用FITC anti- mouse B220抗体（克隆号RA3-6B2）、APC anti-mouse CD5抗体（克隆号53-7.3）和PE anti-mouse CD23（克隆号B3B4）染色后进行流式细胞分析。如图3所示，腹腔灌洗液中基于CD23- B220dim画门（Gate R2）后分析CD5^-和CD5⁺细胞群的比例，分选前CD23^- B220^dim CD5⁺ （B1）细胞群占比23.6%，分选后占比59.8%。

图3. 流式检测腹腔灌洗液分选前后B1 B细胞纯度

用BeaverBeads^®小鼠Pan B细胞分选试剂盒（阴选）从C57BL/6小鼠的脾细胞和骨髓细胞中分选总B细胞。分选前后的细胞用7-AAD染色后进行流式细胞分析。如图4所示，脾细胞分选前活细胞比例为86.3%，分选后活细胞比例为89.9%。骨髓细胞分选前活细胞比例为95.3%，分选后活细胞比例为96.7%。

图4.流式检测分选前后B细胞活率

用BeaverBeads^®小鼠Pan B细胞分选试剂盒（阴选）从C57BL/6小鼠脾细胞中分选总B细胞，加入LPS刺激24小时后，通过流式细胞术检测细胞表面活化分子的表达情况。如图5所示，LPS刺激可显著增强B细胞膜表面CD69，CD80和CD86的表达水平。

图5. LPS刺激后B细胞膜表面活化分子表达上调

对比BeaverBeads^® 小鼠Pan B细胞分选试剂盒（阴选）和竞品Pan B细胞分选试剂盒分选得到的总B细胞的纯度和活率。

（1）从C57BL/6小鼠脾脏细胞、骨髓细胞和腹腔灌洗液中分选总B细胞，分选前后的细胞用APC anti-mouse CD19抗体（克隆号6D5）标记后进行流式细胞分析。如图6所示，使用BeaverBeads^® 小鼠Pan B细胞分选试剂盒（阴选）分选得到的B细胞纯度高于竞品对照组。

图6. BEAVER试剂盒与对照试剂盒分选小鼠全B细胞纯度比较

（2）分别使用小鼠Pan B细胞分选试剂盒（阴选）和竞品Pan B细胞分选试剂盒从脾细胞和骨髓细胞中分选总B细胞，比较细胞分选前后的活率。如图7所示，BeaverBeads^®小鼠Pan B细胞分选试剂盒（阴选）分选得到的B细胞活率在脾细胞和骨髓细胞中均优于竞品对照组。

图7. BEAVER试剂盒与对照试剂盒分选小鼠B细胞活率比较