细胞计数行业金标准——库尔特原理(电阻抗法)

2026-07-01 16:01:16, 环亚生物 环亚生物科技有限公司


技术简介

细胞计数和细胞粒径分析是生命科学研究和临床疾病诊断的基础实验手段,20世纪中叶之前,主要依赖人工显微镜计数,繁琐耗时,且误差极大。


1953 年,美国科学家华莱士·H·库尔特首次将电学传感技术与颗粒计数相结合,提出了库尔特电阻抗检测原理,实现了细胞与微小颗粒的自动化、数字化检测。该原理一经提出便快速产业化了全球首款自动化血细胞分析仪。经过七十余年的迭代优化,库尔特原理已成为成熟的技术体系,是当前应用最广泛、认可度最高的颗粒与细胞检测技术之一。


技术原理

库尔特原理又称电阻抗检测原理,是一种基于电解质溶液电阻变化实现悬浮细胞/颗粒计数与粒径分析的物理检测技术。

其核心逻辑是利用了细胞/颗粒与缓冲液的电学特性差异。在恒定电流设计的电路中,当悬浮在缓冲液中的细胞通过检测孔时,取代相同体积的缓冲液,会导致孔内外两电极之间电阻发生瞬时变化,产生电位脉冲,脉冲信号的幅值与细胞体积成正比,脉冲出现次数与细胞数量对应。

  • 通过电阻抗检测,精准测量细胞数量(细胞/细胞核/PBMC 外周血单个核细胞)

  • 通过电阻抗方式,三维精准测量细胞/颗粒的粒径

  • 检测速度快,可在数秒内完成上千个细胞的细胞计数和粒径测量

  • 检测细胞数量大,统计学准确性高是行业内公认的细胞计数和粒径(直径)测量的金标准

  • 仪器无需校准,免维护,不受细胞种类、形态影响

  • 结合荧光检测,可实现快速细胞活率检测及细胞流式分析



技术比较

成像类计数误差

Moxi库尔特计数误差

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库尔特技术的细胞计数更加精准,误差更小



成像类直方图

Moxi库尔特直方图

库尔特技术的细胞体积测量更加精准,误差更小

可以区分不同粒径大小的细胞和碎片 

&可以分析更小粒径



库尔特技术的细胞计数的误差更小更加精准,

细胞活率测量的误差更小



对比

库尔特流式技术Moxi V / Moxi Go II

明场成像 

PMT

检测器

二极管/PMT

CCD/CMOS

二极管/PMT优势

技术原理

是灵敏度极高,响应速度非常快的单点光探测器。可以把入射的光子转换成电子后,进行倍增放大,在阳极上产生放大的电流信号

电荷耦合器。使用高感光度的半导体材料制成,把照射到CCD上的光子转换成电,再通过模数转换器,转换成数字信号


主要应用

主要用于光学成像等应用

多用于荧光检测,弱光检测等


灵敏度

极高

较高

PMT检测下限更低,能够识别弱光信号

线性动态范围

106

104

PMT检测范围的上下限更宽,定量更准确

光学波段范围

某一具体波段

全光谱

PMT受非目标波长光线影响弱

信噪比

PMT背景噪音更低

温度影响

常温使用时,PMT具有更低的背景噪音

应用优势

荧光检测的活率测量更精准




对比

库尔特电阻抗法

显微成像法

检测原理

电阻抗检测

光学成像,软件识别,算法估算

计数准确度CV(%)

≤5%,精准计数

10-40%,误差较大

粒径测量

采用电阻抗方式测量,3D检测测量精准度更高

根据细胞图像通过算法判断,精度较差

计数体系(µl)

38.5 µl,统计学准确度高

<10 µl(多为0.5 µl)

计数数量

120-40,000

3-400(仅视野内细胞)

检出浓度最低

103,适合低浓度细胞样本和珍贵细胞样本

104

计数速度

极快(8秒内)

较慢(10–30 秒,受图像处理算法影响)

精度与重复性

极高(国际公认细胞计数及粒径测量金标准)

较差(依赖图像质量与算法)

直方图分辨率

1000-1200 bins

40 bins

抗干扰能力

较强

易受细胞聚团、堆叠、分布不均影响

细胞活率测量

更加灵敏,更加精准


细胞分析

单个细胞独立分析 (流式)

群体成像

样本适应性

较高,不受培养基以及细胞颜色,折光率影响

较差,会受细胞透明度影响,对未染色的透明细胞适配度较差



应用方向

细胞治疗、生物制药、生物检测

  • CAR-T/TCR-T 细胞治疗产品 

  • 干细胞制剂

  • AAV腺相关病毒/慢病毒载体生产 

  • 重组蛋白药物/抗体生产 

  • 疫苗生产(细胞基质疫苗)

  • 单细胞测序,单细胞组学

  • 循环血肿瘤CTC检测


肿瘤免疫与精准诊疗

  • 肿瘤免疫治疗监测

  • 液体活检 / 早期诊断(CTC,PBMCs) 

  • 肿瘤疫苗研发 

  • 抗肿瘤药物研发 / 免疫毒性 


感染、炎症、细胞免疫和疫苗

  • 新冠 / 流感 / 艾滋病(HIV)研究 

  • 疫苗开发 / 免疫原性评价 

  • 自身免疫病:类风湿,系统性红斑狼疮研究


单细胞、稀有细胞研究

  • 单细胞测序,单细胞研究

  • 细胞核计数 

  • 低浓度样本计数(支气管肺泡灌洗液,泪液,脑脊液、胸腹水,循环血肿瘤细胞等) 


干细胞和再生医学

  • 胚胎干细胞,肿瘤干细胞 

  • 成体干细胞,祖细胞 

  • 再生医学研究 


细胞体积测量

  • 细胞病理研究

  • 细胞周期研究

  • 发育生物学研究


特殊细胞和微生物计数

  • 精子细胞 

  • 鞭毛虫:贾第鞭毛虫,领鞭毛虫,阿米巴滋养体 

  • 藻类: Algae,颗石藻,甲藻,莱茵衣藻 

  • 真菌:酵母菌 


材料、交叉学科

  • 细胞内药物递送 

  • 纳米材料,血管支架 

  • 石墨烯量子点,磁珠 

  • 微流控(细胞培养) 

  • 生物传感器(细胞毒性) 



应用案例

1)无标记细胞精准计数及健康指数评估

细胞体积测量,评估细胞的健康指数


2)PBMC(外周血单个核细胞)分析

  • 可根据粒径大小,区分红细胞、淋巴细胞和单核细胞 

  • 根据粒径门控,区分红细胞污染(预计RBC5.5µm,门控范围左细胞门从5µm起) 

  • 可选择显示PBMCRBC的门 


PBMC 细胞分析



产品介绍

Moxi Z库尔特流式细胞计数

Moxi V库尔特流式细胞计数+单荧光检测 

Moxi Go II库尔特流式细胞计数+双荧光检测 

  • 精准的细胞计数 

  • 精准的体积测量 

  • 细胞健康指数评估(体积测量) 

  • 精准的细胞计数 

  • 精准的体积测量 

  • 精准的活率测量(荧光检测) 

  • 精准的细胞计数 

  • 精准的体积测量 

  • 精准的活率测量(荧光检测) 

  • 快速的流式分析(荧光检测)


美国Precision cell systems 公司(原Orflo Technologies),专注于库尔特细胞技术,产品以库尔特高精细胞计数仪和库尔特流式细胞仪为主:

  • 细胞计数更精准:细胞/细胞核/PBMC 外周血单个核细胞

  • 体积测量更精准: 无标记细胞健康评估

  • 活率测量更灵敏,更精准

  • 开机即用,10秒出测试结果,使用后无需清洁维护

  • 应用于精准细胞计数、健康评估、单细胞测序文库质控、CAR-T 细胞治疗质控、凋亡/转染检测、活性氧簇、线粒体膜电位等常规流式细胞分析等






环  亚  产  品




环亚生物科技有限公司(APG BIO Ltd)成立于2011年,专注于引进国外创新技术和高品质仪器设备。

主推产品包括




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全自动DNA核酸脉冲场电泳回收仪--美国Sage Science


代替手工切胶和磁珠,用于二代/三代/超长测序文库、常规分子实验的精准回收




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E-Peak 全自动核酸蛋白分析系统--融萦


毛细管原理,全自动、高通量、高灵敏度、高分辨率,对核酸蛋白分离检测和质控




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E-Tracking 微孔板加样记录仪--融萦


实时追踪加样,避免加样错误,兼容384/96孔板、排管,兼容单/8/12通道移液枪




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24通道 明场 实时活细胞成像分析仪--德国innoME


6/24孔板分组对比实验,用于细胞、类器官的生长监测、划痕迁移、培养优化等




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超高通量、高密度微阵列生物芯片点样仪 --英国ArrayJet


单次可喷点上万种生物样品,制备最多1000张高密度生物芯片,用于高通量筛选




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皮升、纳升级高精度微阵列生物芯片点样仪--德国M2 Automation


生物传感器、微流控、微孔板、微柱、微针、覆膜、POCT芯片等点样,可灵活定制




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超高通量 SPRi分子互作仪--美国Plexera


表面等离子共振成像技术,无标记实时动力学检测,最多同时检测3840对分子互作




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E-Pro4 全自动蛋白质免染成像分析仪--融萦


电泳成像一体,用于蛋白、多肽的定性定量、表达分析和纯度检测等




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超高精度组织 原位蛋白功能定量分析系统--西班牙Hawk Biosystems


小于10nm距离的蛋白质相互作用定量验证,用于互作、翻译后修饰、肿瘤免疫等




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毛细管电泳生物制药分析系统--荷兰Prince technologies


纳升级全自动压力浓缩进样,全程控温,用于蛋白纯度/等电点测定、制药质控等





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环亚生物科技有限公司

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