2026-04-23 15:35:09 山东英盛生物技术有限公司
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质谱检测异常结果的分析处理流程
案例
<儿茶酚胺为例>
···
多巴胺(DA)
肾上腺素(E)
去甲肾上腺素(NE)
在临床液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测中,获得准确可靠的实验数据是实验室的核心任务。当实验中出现超出参考范围的异常结果(阳性结果)时,建立一套规范、严谨的分析处理流程至关重要。
本文以儿茶酚胺检测项目为例,结合实际案例——6例样本中发现2号样本NMN(去甲变肾上腺素)及NE(去甲肾上腺素)显著超出正常参考范围,详细梳理异常结果的排查与确认流程。
·· 系统适用性与质控状态检查 ··
在面对任何结果(无论是正常还是异常)时,首要任务是确认当次检测系统的运行状态。需重点检查随行标准曲线(标曲)和质量控制(QC)数据:
♦ 标曲线性验证:
确认各校准点靶值输入无误,且标曲线性相关系数值应满足实验室设定要求(通常 )。
♦ 质控偏差核查:
质控品的测定值偏差需在试剂说明书或实验室规定的允许范围内(如 ±15%)。
♦ 保留时间与积分确认:
检查化合物与其同位素内标的保留时间(RT)是否一致,以确保积分位置正确。
···
案例分析
在本案例中,NMN的相关系数 R2=0.9925,满足 r>0.99的要求;低值质控偏差为 3.47%,高值质控偏差为 12.78%,均在±15%以内。且化合物出峰与同位素内标出峰均在 1.95min 左右,积分位置准确。NE(去甲肾上腺素)的线性及质控表现同样符合要求。
·· 色谱峰形与干扰排查 ··
数据审核通过后,需深入观察样本的具体色谱行为。除了常规检查是否存在拖尾峰或前沿峰外,重点在于识别基质干扰。
♦ 假阳性风险排查:
需警惕个别样本基质中突然出现的干扰峰。如果干扰峰与目标化合物峰保留时间极度接近,可能导致积分合并,从而产生假阳性结果。
♦ 判断标准:
对比目标化合物与同位素内标的峰形,观察是否由于干扰导致峰形明显畸变。
·· 样本物理性状检查 ··
若数据与图谱均无明显异常,下一步需物理检查样本本身的状态。对于大多数内源性化合物的检测,样本的基质效应是不可忽视的干扰因素。
需确认样本是否存在以下情况:
♦ 溶血(Hemolysis):
红细胞破裂释放胞内物质。
♦ 黄疸(Icterus):
胆红素水平过高。
♦ 高脂(Lipemia):
样本呈乳糜状,脂质含量高。
高度溶血、黄疸或高脂的样本极易对检测造成基质干扰,影响定量准确性。
·· 样本采集与前处理合规性确认 ··
样本的采集、运输及保存条件直接影响结果的真实性,特别是对于稳定性较差的化合物。需对照项目说明书核实:
♦ 样本类型:
采血管是否正确(如血清、血浆及抗凝剂种类)。
♦ 保存条件:
是否按要求避光、冷藏或冷冻保存。
♦ 处理时效:
采集到检测的时间间隔是否过长,是否及时离心分离。
若未按要求操作(如未及时分离血清/血浆),可能导致部分不稳定化合物降解,造成检测结果偏低(假阴性)。
···
参考标准
根据《液相色谱-串联质谱法临床样品前处理专家共识》[1],不同项目(如维生素、类固醇激素、儿茶酚胺等)对添加剂及保存条件均有特定要求。
·· 复测验证 ··
为排除前处理操作失误(如加样错误、萃取异常)导致的随机误差,对异常样本进行复测是必要的步骤。
♦ 复测策略:
取原始样本重新进行前处理和上机检测。必要时,若浓度过高,可进行稀释验证。
♦ 结果比对:
将复测结果与初次结果进行比对。若一致性较好,则可排除前处理操作引入的误差。
···
案例分析
本案例中,复测结果与第一次检测结果高度一致(例如 NMN 初测 2476.84 pg/mL,复测 2268.51 pg/mL),证实了实验操作的准确性。
·· 结合临床信息进行最终确证 ··
实验室检测结果必须服务于临床诊疗。在发出最终的异常报告前,应结合患者的临床信息进行综合判断:
♦ 病史与诊断:
查看患者是否有相关疾病史(如高血压、肿瘤等)。
♦ 用药史:
排查药物及其代谢产物是否对检测产生干扰,或药物本身导致了指标升高。
···
案例结论
经核查,该患者有高血压及神经内分泌瘤病史。检测结果真实反映了患者术后体内儿茶酚胺的准确浓度水平。该异常结果并非误差,而是为医生判断治疗效果及制定后续方案提供了重要的辅助依据。
·· 总结 ··
临床质谱检测中异常结果的处理不仅仅是数据的复核,而是一个涵盖“人、机、料、法、环”的全流程质量控制闭环。通过系统状态确认、图谱分析、样本检查、前处理溯源、复测验证、临床关联这六步流程,我们能够有效区分真阳性与假阳性,确保每一份报告的准确与权威。
关于英盛生物
英盛生物技术股份有限公司是一家专注于为精准诊断和预防医学提供基于临床质谱诊断方案的高科技公司。经过十多年的发展形成了集研发、生产、销售于一体,覆盖硬件平台、软件系统、配套试剂及耗材供应的完整产业链。
公司以满足临床需求为己任,在国内最先推出了基于液相色谱-串联质谱平台的维生素14项测定试剂盒,是我国临床质谱的开拓者,是临床质谱整体解决方案的领航者,目前已覆盖四大质谱技术平台,LC-MS/MS、ICP-MS、核酸质谱和高分辨质谱,且已获得II/III类注册证50余项,质谱试剂CE注册证近40项。
创新是企业生存之本,质量是公司立足之根。公司自成立以来在研发、生产、销售等环节中不断创新,获得多项国家专利授权并通过医疗器械质量管理体系ISO13485:2016认证,以严苛的质量,为临床精准诊断保驾护航。
参考文献:
[1] 液相色谱-串联质谱法临床样品前处理专家共识 [J]. 中华预防医学杂志, 2023, 57 (12): 2073-2085.
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