2026-03-05 13:40:16, Bei Chang Cytiva(思拓凡)
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指标名称 | 关注问题 | 工艺开发中能回答的问题 |
通量(Flux) | 过滤速度快不快? | 过滤需要多长时间?是否满足生产要求? |
通量衰减 (Flux Decline) | 会不会越过滤越慢? | 工艺是否稳健、会不会堵? |
最大载量 (Vmax) | 最多能过滤多少? | 需要多少滤膜面积?滤器片数及成本如何? |
图1:可滤性测试的重要指标
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除病毒滤膜的选型
Cytiva提供一系列用于病毒去除产品,包括Pegasus Prime以及Pegasus SV4等病毒过滤膜,覆盖了从常规单抗体系到高黏度、高复杂样品的多类应用需求。
图2:Cytiva除病毒滤膜产品
在实际工艺搭建中,滤膜的选择会直接影响病毒过滤步骤的稳健性与效率。而不同的样品具有不同的颗粒负荷、聚集水平与黏度。因此在进入病毒过滤之前,必须同时完成两件事:选好预过滤膜处理杂质,选好纳滤膜实现病毒截留。二者合在一起,决定了后续过滤是否顺畅。
图3:预过滤膜与除病毒滤膜选型
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影响除病毒过滤的因素
预过滤膜
除病毒滤膜的孔径非常小,用于病毒级别的截留,因此前端任何颗粒、聚集体、脂质或不可溶杂质都可能迅速堵膜。预过滤的作用,就是降低病毒过滤的堵塞压力并提高通量。不同体系的预过滤策略有所不同。对于颗粒负荷较高较复杂的样品,深层膜材通常更合适;如果体系中的蛋白对吸附较敏感,则可考虑低吸附性PVDF膜材。
图4:常见预过滤膜材与特点
图5:某单抗产品(12 mg/ml,PB buffer,pH6.2)采用不同预过滤膜搭配Prime过滤曲线
料液性质
除病毒滤膜的表现高度依赖料液的性质。常见影响因素包括蛋白浓度、聚集体含量、pH 与盐浓度等。
图6:影响料液性质的因素与优化建议
可滤性测试怎么做
在实际操作中,可按照下图提供的步骤进行连接、预冲洗、进样和记录数据。如果你是第一次尝试,配合示例视频可以更快上手哦。
图 7:可滤性测试步骤流程
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👆🏻 DJL+SV4篇👆🏻
👆🏻 Protect+Prime篇 👆🏻
实验结果
实验结束后,可以根据记录数据绘制过滤曲线。下图展示了两个典型的实验案例:
低浓度样品(2 mg/mL):Protect+Prime过滤载量高达 1550 L/m²,滤速 476 LMH,几乎无衰减
高浓度样品(46 mg/mL):DJL+SV4载量为209.5 L/m²,平均滤速 33.1 LMH,滤速衰减41.2%
图8:过滤曲线(上图:低浓度样品;下图:高浓度样品)
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