食品标准更新速递 | 食品中纽甜的测定

2025-11-10 13:04:27, 市场部飞诺美

纽甜，又名N-[N-(3，3一二甲基丁基)-L-α-天门冬氨]-L-苯丙氨酸-1-甲酯，是一种白色结晶粉末，含约4.5%的结晶水，是一种功能性甜味剂。纽甜具有纯正的甜味，十分接近阿斯巴甜，没有其他强力甜味剂常带的苦味和金属味，甜度比蔗糖甜7000～13000倍，比阿斯巴甜甜30～60倍但是能量值几乎为零，此外它还可以在瞬时高温的条件下保持稳定，例如在蛋糕生产中，经过4500℃的高温焙烤后，仍有85%的纽甜存在，是比较稳定的甜味剂，综上，在许多食品的生产中，纽甜发挥着重要作用。

部分食品中纽甜限量

GB 5009.247-2025 食品安全国家标准食品中纽甜的测定标准在2025年进行了更新，广泛用于食品相关的纽甜检测。具体有哪些值得关注的知识点呢？让我们跟随飞诺美的实验方案来看一看。

具体方案

前处理：

果冻基质

▸称量：称取5g（精确至0.01g）果冻试样于50mL离心管中，加标；

▸提取：加入25mL混合提取液，于60℃水浴振荡 30min至样品溶化。冷却至室温，测溶液PH在4.5左右，不需调节PH，超声30min。加入1mL 亚铁氰化钾溶液（92g/L）和1mL乙酸锌溶液（183g/L）涡旋混匀，4000r/min离心5min。上清液转移至50mL容量瓶中。残渣加入20mL混合提取液，振荡5min，4000r/min离心5min，合并上清液，用混合提取液定容至刻度，待净化；

▸活化：Cleanert PEP小柱依次用6mL甲醇、6mL 水活化，保持柱体湿润；

▸上样：准确将10.0mL样液上样过柱；

▸淋洗：用5.0mL 甲醇-三乙胺缓冲液淋洗小柱，真空抽干10min；

▸洗脱：8.0mL混合洗脱液洗脱小柱，抽干；收集洗脱液于60℃氮吹浓缩至约1mL，用甲酸-三乙胺缓冲液定容至2.0mL，过0.45μm 尼龙滤膜，上机待测。

沙拉酱基质

▸称量：称取5g（精确至0.01g）沙拉酱试样于 50mL离心管中，加标；

▸提取：加入25mL混合提取液，于60℃水浴振荡 30min。冷却至室温，加5mL正己烷，振荡 5min，4000r/min离心5min，弃去正己烷层。测溶液PH在4.5左右，不需调节PH，超声30min。加入1mL亚铁氰化钾溶液（92g/L）和1mL乙酸锌溶液（183g/L）涡旋混匀，4000r/min离心 5min。上清液转移至50mL容量瓶中。残渣加入 20mL混合提取液，振荡5min，4000r/min离心 5min，合并上清液，用混合提取液定容至刻度，待净化；

▸活化：Cleanert PEP小柱依次用6mL甲醇、6mL 水活化，保持柱体湿润；

▸上样：准确将 10.0mL样液上样过柱；

▸淋洗：用 5.0mL 甲醇-三乙胺缓冲液淋洗小柱，真空抽干10min；

▸洗脱：8.0mL混合洗脱液洗脱小柱，抽干；收集洗脱液于60℃氮吹浓缩至约1mL，用甲酸-三乙胺缓冲液定容至2.0mL，过0.45μm 尼龙滤膜，上机待测。

色谱条件

▸色谱柱：Kinetex C18，4.6×150mm，5µm；

▸流动相：A：乙酸铵溶液（20mmol/L），B：甲醇；

▸流速：1.0 mL/min；

▸柱温：25 ℃；

▸进样量：10 μL；

▸梯度洗脱：

实验结果

纽甜标准曲线

纽甜标准曲线图

实验选择4.8mg/kg浓度添加计算回收率结果，平行6组，基质添加浓度的回收率≥90%，RSD＜1%。

果冻基质加标回收实验结果

沙拉酱基质加标回收实验结果

果冻样品色谱图（纽甜理论添加浓度4.8mg/kg）

沙拉酱样品色谱图（纽甜理论添加浓度 4.8mg/kg）

实验结论

本实验重现了GB5009.247-2025 食品安全国家标准食品中纽甜的测定，使用Cleanert PEP结合液相色谱的检测方法对果冻、沙拉酱等基质进行了纽甜的测试。试样用混合提取液提取，含胶基试样经水浴溶解、高脂肪试样经正己烷脱脂，蛋白沉淀剂沉淀蛋白，Cleanert PEP, 500mg/6mL(PE5006)固相萃取柱净化，Kinetex C18,4.6×150mm,5μm ( 00F-4601-E0) 液相色谱柱进行检测，采用外标法定量。结果表明，添加水平的相对回收率均≥90%，RSD均＜1%，能够满足检测要求。值得注意的是，样品经混合提取液提取后测量PH值，若在PH 4.5左右可以省去甲酸或氨水（20%）调节PH这一步骤以提高实验效率。

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