为什么会出现M型峰?

作为检验员，在色谱图分析的过程中，通常都会遇到一个令人头大的问题，就是M型峰。即使是标准品，也会出现这种现象，但又不知道是什么原因造成的，不管是调整流动相还是换色谱柱，好像有点改善，但又好像没有，着实是令人头疼。今天作者以自身经验和大家分享一下M型峰的成因以及一些对应的解决方法。

溶剂效应的成因是因为定容液与流动相之间极性差异过大而导致的。

对于反相体系来说，流动相通常极性比较大，而很多时候定容液是纯甲醇或者纯乙腈，极性较低，因此，在进样后，液滴外部会被优先洗脱，导致部分目标物“走得更快”，从而最终出现M型峰。

如果是这种情况造成的M型峰，可以适当在定容液中加一定比例的水，提高极性，或者直接使用流动相定容，如果是操作条件受限的话，也可以通过减小进样体积来改善这一状况。

这种情况更多的是见于酸碱盐化合物当中，例如苯甲酸、山梨酸、三聚氰胺、人工合成色素等，此类化合物由于在不同的pH条件下，可能会同时存在离子和分子形态，这会使其在色谱柱和流动相之间产生不同的作用力，从而导致出峰时间出现差异，形成M型峰。对于这种情况，我们可以对流动相的pH进行调节，或加入缓冲盐，使其保持在同一形态。

同分异构体一般分为以下几种，官能团种类异构、官能团位置异构、顺反异构、手性异构，当然还有其他不常见的异构方式。

异构的情况是比较难解决的，由于主体结构相似，因此不管是光谱或者分子量都难以对其进行区分，只能通过色谱进行分离。这种情况可以通过调节梯度洗脱程序尝试分离，如果效果仍然不理想，同时没有特别的目标物区分要求的话，可以尝试加大流动相中的有机相比例，令目标物加快出峰，使M型峰压缩成一个峰进行定量。 

例如：人工着色剂的国标GB 5009.35-2016，其中,亮蓝这种物质的标准物就是有2个形态，但国标中只有一个峰（GB 5009.35-2023中两个峰才被分开）。它的洗脱条件并没有使其分离，我们在实际检测中，如果把梯度洗脱的变化放慢一点，它们就会分开，但又很难完全分开，而且完全分开的话意义也不大，因为还要对2种形态命名，所以就把它们都当做是亮蓝。